FNS與共移植體對移入MCAO模型大鼠的NSCs增殖、凋亡的影響.pdf

1、目的： (1)本實驗通過由神經(jīng)干細胞、基質(zhì)、腦微血管內(nèi)皮細胞構(gòu)建的其移植體植入缺血/再灌注鼠腦內(nèi)的紋狀體區(qū)，觀察神經(jīng)干細胞增殖與凋亡的情況。 (2)通過整體干預(yù)(小腦頂核刺激)，觀察共移植體中神經(jīng)干細胞在缺血/再灌注鼠腦內(nèi)的紋狀體區(qū)的增殖、凋亡情況。為患有腦血管病的患者期望找到好的方法，通過這種方法不僅使他們的神經(jīng)細胞得到再生的可能，而且對其結(jié)構(gòu)盡快修復，功能的盡快整和起到很大的作用。 方法：同一基因背景鼠80只

2、，體重300-350克，雄性6月齡，通過線栓法制備大腦中動脈局灶腦缺血/再灌注模型(MCAO模型)，隨機分為(1)正常對照組(3、7、14、60d4個時間點，每個時間點2只)；(2)神經(jīng)干細胞+小腦頂核刺激組；(3)共移植體組；(4)共移植體+小腦頂核刺激組(3、7、14、60d 4個時間點，每個時間點6只)。用小腦頂核刺激儀作線栓模型操作前刺激1小時。于模型制各完后24小時用立體定位儀分別將共移植體及神經(jīng)干細胞(被Brdu標記)，注入

3、鼠腦的紋狀體區(qū)。通過TTC染色和HE染色來了解腦梗塞后腦組織的病理學變化判斷模型制備情況。通過免疫組織化學和免疫熒光方法檢測Brdu陽性細胞隨時間點和干預(yù)手段不同的表達變化，了解共移植體和/或小腦頂核刺激后神經(jīng)干細胞增殖和凋亡情況。通過顯微圖像分析系統(tǒng)對陽性結(jié)果進行分析。 結(jié)果： (1)移入腦內(nèi)的共移植體組的神經(jīng)干細胞增殖數(shù)目優(yōu)于神經(jīng)干細胞組：凋亡率低于神經(jīng)干細胞組； (2)共移植體組+小腦頂核刺激組增殖數(shù)目各時

4、間點均好于共移植體組、神經(jīng)干細胞+小腦項核刺激組；凋亡率低于共移植體組、神經(jīng)干細胞+小腦頂核刺激組。 (3)共移植體組+小腦頂核刺激組增殖、共移植體組增殖率7天增高，14天達高峰，60天下降。凋亡率3、7天無顯著差異，14天與3、7天比差異顯著，60天與14比差異顯著，凋亡的細胞更少。 結(jié)論： 1.共移植體適合體內(nèi)移植治療大鼠腦缺血再灌注模型，并在各方面表現(xiàn)出優(yōu)于單純干細胞移植。 2.整體干預(yù)(小腦頂核刺