甲基硫氧嘧啶對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖與凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)體外分離、培養(yǎng)及鑒定大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞，研究甲基硫氧嘧啶對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖與凋亡的影響，為進(jìn)一步探討它對(duì)骨髓造血微環(huán)境的影響及作用機(jī)理提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　1.體外分離、培養(yǎng)及鑒定SD大鼠的骨髓基質(zhì)細(xì)胞，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)研究。
　　2.應(yīng)用CCK-8法觀察甲基硫氧嘧啶對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖的影響。
　　3.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)甲基硫氧嘧啶對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響。
　

2、　結(jié)果:
　　1.通過(guò)全骨髓貼壁法得到貼壁生長(zhǎng)，形態(tài)均一的單層細(xì)胞;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示CD90表達(dá)陽(yáng)性、CD34與CD45表達(dá)陰性，鑒定成功。
　　2.CCK-8法檢測(cè)結(jié)果顯示:隨著甲基硫氧嘧啶濃度增加與作用時(shí)間延長(zhǎng)，增殖抑制作用逐漸增強(qiáng)。同一時(shí)間，從40mmol/L起，隨著濃度增加，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。同一濃度，隨著作用時(shí)間延長(zhǎng)，不同時(shí)間組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與12h

3、組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。作用48小時(shí)，對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用最強(qiáng)。
　　3.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示:從40mmol/L起，隨著藥物濃度的增加，細(xì)胞的凋亡率逐漸增加，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);不同組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.全骨髓貼壁法成功獲得SD大鼠BMSCs。
　　2.甲基硫氧嘧啶具有抑制骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖和促進(jìn)其凋亡的作用。