二烯丙基二硫?qū)Υ笫蟾涡菭罴?xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)分泌的影響及機制.pdf

1、目的：研究二烯丙基二硫（DADS）對大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC-T6）增殖及細(xì)胞外基質(zhì)分泌的影響，并探討是否通過上調(diào)RORa而抑制Wnt/β-catenin信號通路從而抑制肝纖維化。
　　方法：以HSC-T6為研究對象，分別用不同的濃度的（10、20、40、80 mg/L）DADS處理HSC-T6細(xì)胞不同時間后，用MTT法分析DADS對HSC-T6細(xì)胞的增殖抑制作用，得出最適濃度范圍及最佳時間。用酶聯(lián)免疫法（Elisa）測定肝纖維化指

2、標(biāo)Ⅲ型前膠原（PCⅢ）、層粘連蛋白（LN）的表達(dá)。采用 RT-PCR法觀察細(xì)胞β-catenin、cyclin D1mRNA的表達(dá)。Western Blot法測定β-catenin、cyclin D1、RORα蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：MTT結(jié)果提示DADS抑制大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC-T6）增殖，呈時間-劑量關(guān)系。從整體上來看，相對藥物作用48 h后效果最好，其IC50為42.06 mg/L，酶聯(lián)免疫法結(jié)果提示DADS能抑制PCⅢ、

3、LN蛋白的分泌（P<0.05）， RT-PCR結(jié)果提示能下調(diào)β-catenin,cyclin D1mRNA的表達(dá)（P<0.05）， Western Blot法結(jié)果提示能下調(diào)β-catenin,cyclin D1蛋白的表達(dá)以及上調(diào)RORα蛋白的表達(dá)（P<0.05）。
　　結(jié)論：在本實驗條件下，DADS對大鼠肝星狀細(xì)胞的增殖及細(xì)胞外基質(zhì)分泌有抑制作用，其機制可能是通過上調(diào)RORα抑制大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC-T6） Wnt/β-cate