Miz1在阿爾茨海默病中的表達(dá)特征及其與自噬的關(guān)系研究.pdf

1、目的：在WT和APP/PS1小鼠腦組織急性分離的神經(jīng)元RNA序列分析中發(fā)現(xiàn)Miz1有差異表達(dá)，故本研究利用Western blotting、qPCR、免疫熒光等方法，探討Miz1與AD之間可能存在的關(guān)系。
　　結(jié)果：⑴Miz1在 APP/PS1鼠大腦皮層的表達(dá)較同齡 WT鼠高。通過Western blot方法發(fā)現(xiàn)Miz1在7月齡APP/PS1鼠和WT鼠的皮層在蛋白水平有差異表達(dá)，Miz1在APP/PS1鼠皮層中相較于WT鼠皮層表達(dá)

2、增加，同時，Miz1在兩者的海馬中表達(dá)沒有明顯差異。同樣的，分離并提取7月齡 APP/PS1鼠和 WT鼠的皮層與海馬的 RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，通過qPCR的方法分析Miz1的表達(dá)，也發(fā)現(xiàn)了Miz1在APP/PS1鼠皮層中的高表達(dá)而海馬未見明顯差異。通過免疫組化的方法，我們研究了Miz1在WT和 APP/PS1小鼠中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn) Miz1在7月齡APP/PS1小鼠皮層的高表達(dá)，而在海馬未發(fā)現(xiàn)明顯差異。⑵利用免疫熒光的方法，我們研究了M

3、iz1在7月齡APP/PS1鼠和WT鼠腦中的表達(dá)及定位情況。所用MAP2、GFAP、Miz1抗體的分別標(biāo)記小鼠腦中神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、Miz1，通過激光共聚焦顯微鏡采集圖像，發(fā)現(xiàn)Miz1標(biāo)記的圖像與APP/PS1鼠和WT鼠腦中神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞的圖像均有一定重疊，說明Miz1在APP/PS1鼠和WT鼠的神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞中均有一定程度的表達(dá)。⑶將質(zhì)粒PCMV-Miz1瞬時轉(zhuǎn)染到HT22細(xì)胞中，處理24小時后提取細(xì)胞蛋白進(jìn)行West