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文檔簡介
1、目的:觀察姜黃素(Curcumin)和雷帕霉素(Rapamycin)對阿爾茨海默病模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力、海馬區(qū)Aβ表達(dá)及神經(jīng)元自噬的影響,探討姜黃素在阿爾茨海默病中的神經(jīng)保護(hù)作用及可能的機制。
方法:健康7周齡雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠80只,隨機分成四組:對照組、AD模型組、姜黃素組和雷帕霉素組,對后三組大鼠雙側(cè)海馬CA1區(qū)注射Aβ1-42,構(gòu)建AD大鼠模型;對照組則予以等體積生理鹽水注射。藥物干預(yù)在造模前
2、5天即開始,對照組和AD模型組予以生理鹽水腹腔注射,姜黃素組和雷帕霉素組則分別予以姜黃素(300mg/kg/d)和雷帕霉素(1mg/kg/d)腹腔注射;直至術(shù)后第21天處死全部大鼠。采用Morris水迷宮檢測大鼠學(xué)習(xí)記憶能力;HE染色觀察海馬神經(jīng)元形態(tài);免疫組化法觀察海馬內(nèi)Aβ1-40表達(dá);電鏡觀察CA1區(qū)神經(jīng)元內(nèi)自噬體;Western Blot測定海馬內(nèi)自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表達(dá)。
結(jié)果:1.Morris
3、水迷宮結(jié)果:定位航行試驗中,AD模型組逃避潛伏期較對照組明顯延長(P<0.01);姜黃素組、雷帕霉素組逃避潛伏期較AD模型組縮短(P<0.05),姜黃素組和雷帕霉素組之間差異無顯著性(P>0.05);空間探索實驗中,AD模型組原平臺象限游泳時間(路程)/總時間(總路程)的比值明顯小于對照組(P<0.01);姜黃素組、雷帕霉素組的上述比值均大于AD模型(P<0.05),姜黃素組和雷帕霉素組之間差異無顯著性(P>0.05)。
2.
4、HE染色:對照組海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)正常;AD模型組海馬正常形態(tài)神經(jīng)元數(shù)量減少,伴較多凋亡改變;姜黃素組、雷帕霉素組神經(jīng)元形態(tài)基本正常。
3.免疫組化:AD模型組海馬內(nèi)Aβ1-40表達(dá)較對照組明顯增多(P<0.01);姜黃素組和雷帕霉素組Aβ1-40表達(dá)較AD模型組減少(P<0.05),姜黃素組和雷帕霉素組之間差異無顯著性(P>0.05)。
4.電鏡檢測:對照組海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞微結(jié)構(gòu)正常并可見少量自噬體;AD模型組海馬
5、CA1區(qū)神經(jīng)元內(nèi)可見較多自噬體堆積,線粒體腫脹,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)松散,核膜邊界欠清;其余兩組中僅見少量自噬體,細(xì)胞核和細(xì)胞器微結(jié)構(gòu)大致正常。
5.Western Blot測定:對照組、姜黃素組、雷帕霉素組海馬中Beclin-1、LC3-Ⅱ表達(dá)明顯高于AD模型組(P<0.05),而對照組、姜黃素組、雷帕霉素組之間差異無顯著性(P>0.05)。
結(jié)論:1.姜黃素和雷帕霉素可改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,減輕海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)神經(jīng)元損害,
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