血小板膜糖蛋白GPⅠbα、GPⅡb-Ⅲa及P-選擇素在肺癌患者外周血中的表達(dá).pdf

1、目的：腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡的一個(gè)重要原因，研究表明血小板參與了腫瘤細(xì)胞的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，而血小板表面粘附分子與腫瘤細(xì)胞表面配體的相互作用在其中起重要作用。因此研究腫瘤患者血小板表面粘附分子的表達(dá)及血小板的功能對(duì)于如何抑制腫瘤細(xì)胞的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移具有一定的指導(dǎo)意義，故本課題主要研究肺癌患者血小板表面重要粘附分子GP Ibα、GP IIb/IIIa及P-選擇素的表達(dá)，以及血小板的功能，為抑制肺癌細(xì)胞的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：在體

2、外，收集并分離健康志愿者及肺癌患者外周血標(biāo)本各60例，離心獲取富含血小板的淡黃色上清（platelet-rich plasma, PRP）,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板表面粘附分子GP Ibα、GP IIb/IIIa及P-選擇素的表達(dá)；將肺癌患者富含血小板的上清（PRP）高速離心，棄去血小板，獲取肺癌患者血小板缺乏的血漿（platelet-poor plasma, PPP）刺激健康志愿者洗滌的血小板，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)及Western blot

3、技術(shù)分別檢測(cè)血小板粘附分子GP Ibα、GP IIb/IIIa及P-選擇素的表達(dá)及血小板內(nèi)GP Ibα的總含量；應(yīng)用聚集儀檢測(cè)健康志愿者及肺癌患者血小板在二磷酸腺苷（ADP）、膠原蛋白（Collagen）等不同生理刺激劑誘導(dǎo)下的功能變化。
　　結(jié)果：肺癌患者血小板粘附分子GP Ibα、GP IIb/IIIa及P-選擇素的表達(dá)均較健康志愿者增高，且肺癌患者血小板粘附分子的熒光表達(dá)強(qiáng)度值分別為 GP Ibα（13.94±2.69）、G

4、P IIb/IIIa（7.67±1.89）、P-選擇素（2.84±0.60），健康志愿者血小板粘附分子的熒光表達(dá)強(qiáng)度值分別為GP Ibα（7.92±2.12）、GP IIb/IIIa（5.21±0.58）、P-選擇素（1.42±0.24）。使用肺癌患者血小板缺乏的血漿（platelet-poor plasma, PPP）刺激健康志愿者洗滌血小板，可以促進(jìn)健康志愿者血小板粘附分子GP Ibα的合成增加以及膜粘附分子GP Ibα、GP II

5、b/IIIa及P-選擇素的表達(dá)增加。用ADP、Collagen生理刺激劑誘導(dǎo)血小板時(shí)，肺癌患者血小板較健康志愿者血小板更容易發(fā)生聚集，表明肺癌患者血小板發(fā)生聚集的能力增強(qiáng)。晚期肺癌患者（III-IV期）血小板粘附分子GP Ibα、GP IIb/IIIa及P-選擇素的表達(dá)較早期肺癌患者（I-II期）增高（P＜0.01）；而肺癌患者血小板粘附分子GP Ibα、GP IIb/IIIa及P-選擇素的表達(dá)在肺癌的不同病理類型之間無(wú)明顯差異（P＞0