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文檔簡介
1、本研究分為二部分:
第一部分:天然CD4+CD25+T細胞對ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化影響
目的: 探討ApoE-/-小鼠CD4+CD25+T細胞的比例和功能及其與動脈粥樣硬化的關系。
方法: 從apoE-/-小鼠外周血流式細胞儀(FCA)檢測CD4+CD25+T細胞的比例并分分選之;混合淋巴細胞反應(MLR)研究CD4+CD25+T細胞的免疫抑制功能;ELISA法測定上清液中細胞因子IL-
2、10、TGF-β濃度;觀察ApoE-/-小鼠動脈粥樣斑塊的形成狀況。
結果:與正常小鼠相比,ApoE-/-小鼠外周血中CD4+CD25+T細胞數(shù)量無差異,但抑制naive T細胞增殖能力弱,分泌更少IL-10、TGF-β;ApoE-/-小鼠斑塊面積較大。
結論: ApoE-/-小鼠CD4+CD25+T細胞抑制功能弱,可能因此免疫失穩(wěn)而致動脈粥樣硬化。
第二部分:HSP60特異性調(diào)節(jié)性T細胞的誘導
3、及其對小鼠動脈粥樣硬化影響
目的: 探討抗原特異性CD4+CD25+T細胞的體外誘導及其對動脈粥樣硬化斑塊形成的影響。
方法: 從apoE-/-小鼠分離骨髓單個核細胞,經(jīng)雷帕霉素(RPM)處理培養(yǎng)出未成熟樹突狀細胞(DC);體外誘導HSP60特異性調(diào)節(jié)性T細胞分化;流式細胞儀(FCA)檢測及分選CD4+CD25+T細胞;混合淋巴細胞反應(MLR)研究CD4+CD25+T細胞的特異性抑制效應;ELISA法測定上
4、清液中細胞因子IL-10、TGF-β和IFN-γ濃度。過繼轉移CD4+CD25+T細胞后,觀察小鼠動脈粥樣斑塊的形成狀況。
結果: 雷帕霉素處理的DC共刺激分子CD80和CD86表達明顯減少,形態(tài)學表現(xiàn)為未成熟樹突狀細胞;未成熟樹突狀細胞比成熟樹突狀細胞能誘導更多CD4+CD25+T細胞;培養(yǎng)體系中細胞因子IL-10、TGF-β水平明顯升高;CD4+CD25+T細胞能抑制效應性T細胞的增殖及IFN-γ的分泌。過繼HSP60
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