Fractalkine在低氧性肺動(dòng)脈高壓中的作用.pdf

1、目的:觀察低氧性肺動(dòng)脈高壓形成過程中大鼠血清和肺組織中fractalkine(FKN)的表達(dá)變化，以及低氧對(duì)離體培養(yǎng)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞和肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌FKN的影響，F(xiàn)KN對(duì)離體培養(yǎng)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響，探討FKN在低氧性肺動(dòng)脈高壓中的作用。 方法: (1)將36只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、低氧1天、3天、7天、14天及21天組。以常壓低氧復(fù)制肺動(dòng)脈高壓模型，右心導(dǎo)管插入法檢測平均肺動(dòng)脈壓(mPAP

2、)；分別稱量大鼠右心室(RV)和左心室加室間隔(LV+S)的重量，計(jì)算出右心室肥厚指數(shù)：RV/(LV+S)；圖像分析法測量肺小動(dòng)脈管壁厚度和面積，計(jì)算出肺小動(dòng)脈管壁厚度指標(biāo)即管壁厚度占血管外徑的百分比(WT％)和管壁面積占血管總面積的百分比(WA％)；酶聯(lián)免疫法檢測肺組織勻漿和血清FKN濃度，原位雜交和免疫組化法觀察肺小動(dòng)脈FKN mRNA及蛋白的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄．聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法觀察大鼠肺組織FKN mRNA的表達(dá)。(2)

3、低氧處理離體培養(yǎng)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞和肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞，采用原位雜交和免疫組化法檢測兩種細(xì)胞中FKN mRNA和蛋白的表達(dá)，酶聯(lián)免疫法檢測兩種細(xì)胞上清液中FKN的濃度。(3)以不同濃度的FKN刺激常氧或低氧情況下培養(yǎng)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，采用流式細(xì)胞分析法檢測其細(xì)胞周期變化。 結(jié)論: (1)慢性低氧可以刺激FKN的合成和釋放，F(xiàn)KN可能參與了低氧性肺血管重建過程。(2)低氧在轉(zhuǎn)錄水平上增強(qiáng)了離體培養(yǎng)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞表