柑橘逆境中外源亞精胺的作用及多胺類基因SAMDC的表達分析.pdf

1、華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文柑橘逆境中外源亞精胺的作用及多胺類基因SAMDC的表達分析姓名：林佳申請學位級別：碩士專業(yè)：果樹學指導教師：胡春根20060601柑橘逆境中外源鼯精胺的作用及多胺類基凼SAMDC的表達分析柑橘逆境中外源亞精胺的作用及多胺類基因翩徹C的表達分析摘要柑橘是世界上重要的經(jīng)濟水果，深受人們喜愛。柑橘又是～種畏寒，喜溫、忌鹽堿的果樹。周期性凍害、突發(fā)性寒潮，及海涂鹽漬地、過渡耕作產(chǎn)生的次生鹽漬化，不同程度地影響著柑橘的產(chǎn)量

2、及品質(zhì)。研究柑橘在冷、鹽逆境下的生理變化及抗性調(diào)節(jié)具有重要的理論和現(xiàn)實意義。本文采用生長均一性好、逆境條件易于控制的愈傷組織研究體系，對柑橘不同品種愈傷組織在逆境下的生理變化、外源多胺對逆境下的抗性調(diào)節(jié)以及多胺合成酶類的基因SAMLlC的分離和表達作了初步的研究。主要研究結果如下；1對柑橘愈傷組織進行鹽(Nacl)脅迫(0rmol／L一200retool／L)35d后測定其增重情況發(fā)現(xiàn)：低鹽濃度，尤其是25mmol／L對愈傷的生長有促進

3、作用。而150mmol／L以上，愈傷的生長受到抑制，200mol／L以上愈傷大量死亡。不同品種間的表現(xiàn)不同，構頭橙在150mmol／L以下的鹽脅迫中表現(xiàn)了較強的抗鹽性，寧波金柑次之，紐荷爾最差。2對柑橘愈傷進行低溫脅迫(4℃，Oh一9d)處理后培養(yǎng)35d測定其增重情況發(fā)現(xiàn)：低溫脅迫12h和24h對愈傷的生長有明顯促進作用，而低溫脅迫5d以上，生長緩慢，低溫脅迫9d以上的生長基本停止不同品種間也表現(xiàn)了差異，其中構頭橙對低溫表現(xiàn)更敏感，脅迫

4、5d后愈傷的增殖明顯減緩。3在鹽脅迫對柑橘愈傷組織的電導率及丙二醛含量的研究中發(fā)現(xiàn)：隨著脅迫時間的增長，相對電導率的值表現(xiàn)為持續(xù)上升，24h以下的上升幅度較大；同樣的，丙二醛的含量也是隨脅迫時間的加長而逐漸上升；相反，在4℃低溫脅迫中發(fā)現(xiàn)，相對電導率變化不大，而丙二醛的含量有所增加。表明高鹽脅迫中的細胞膜受到較大程度損傷。4外加05咖ol／LSpd對愈傷的生長有促進作用。05n朋ol／L的Spd對鹽脅迫和低溫脅迫下的愈傷的生長同樣有促進

5、作用。在短時間鹽脅迫和低溫脅迫下，Spd極大地促進了愈傷的增殖。而在較長時間的脅迫后，Spd的作用不明顯。在進一步的相對電導率的測定中發(fā)現(xiàn)，鹽脅迫下愈傷的電導率在加入Spd后下降，而低溫脅迫下的加入Spd前后的愈傷變化不大。5通過分離SA^／DC基因片段來實現(xiàn)對多胺類基因的表達研究。分離獲得尉腳F基因片段(743bp)，經(jīng)過半定量RTPCR研究發(fā)現(xiàn)：在低溫脅迫中，脅迫后的愈傷組織中SAMDC的表達量均有上升，尤以脅迫ld的上升較為明顯，