小分子干擾RNA抑制胃癌細(xì)胞COX-2基因表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：我國是胃癌高發(fā)地區(qū)，其死亡率居各類癌癥死亡之首。手術(shù)、放療、化療等傳統(tǒng)的胃癌治療方法效果不理想，5年生存率低、腫瘤復(fù)發(fā)率高仍是治療上的難題。許多研究表明環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)在胃癌組織中表達(dá)增多，并且與胃癌的生長和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。大量試驗(yàn)研究顯示，長期服用非甾體抗炎藥(nonsteroidalanti-inflammatorydrugs，NSAIDs)可以通過抑制COX-2的活性抑制胃癌的發(fā)生

2、發(fā)展過程。近年來RNA干涉(RNAinterference，RNAi)作為一種嶄新的實(shí)驗(yàn)方法被廣泛應(yīng)用于基因功能的研究，如能應(yīng)用特異性小分子干擾RNA(smallinterferingRNA，siRNA)抑制胃癌細(xì)胞COX-2基因表達(dá)，則可抑制胃癌的發(fā)生發(fā)展，進(jìn)而為腫瘤的基因治療提供新的策略和途徑。 目的：觀察瞬時轉(zhuǎn)染特異性siRNA對胃癌細(xì)胞COX-2表達(dá)和細(xì)胞增殖與凋亡的影響，進(jìn)而探討COX-2在胃癌發(fā)生中的作用和RNAi對

3、腫瘤的治療作用。 方法：以胃癌細(xì)胞系SGC7901為研究對象，培養(yǎng)后瞬時轉(zhuǎn)染特異性siRNA，轉(zhuǎn)染后72小時用RT-PCR法分別檢測RNAi組、無意義組與對照組COX-2mRNA的表達(dá)，用免疫組化法檢測三組COX-2蛋白質(zhì)的表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測三組胃癌細(xì)胞周期和凋亡的變化，轉(zhuǎn)染后1周內(nèi)每天同一時間用MTT法檢測三組存活的癌細(xì)胞數(shù)并計(jì)算RNAi組與無意義組的癌細(xì)胞相對生存率。 結(jié)果：瞬時轉(zhuǎn)染siRNA對癌細(xì)胞COX-2mR