鼻咽癌轉(zhuǎn)移的線粒體蛋白質(zhì)組研究.pdf

1、目的:分析和鑒定鼻咽癌轉(zhuǎn)移中線粒體蛋白質(zhì)組的改變，篩選與鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的線粒體蛋白質(zhì)，為進一步揭示它們參與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的分子機制和找尋與鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的特異性分子標志物提供基礎(chǔ)。
　　方法:分別從鼻咽癌5-8F和6-10B細胞中分離線粒體，鑒定其純度，提取線粒體蛋白質(zhì)。經(jīng)2D-DIGE技術(shù)找出兩種細胞的線粒體差異蛋白質(zhì)，進行MALDI-TOF和ESI-Q-TOF質(zhì)譜分析，查詢數(shù)據(jù)庫鑒定。同時采用生物信息學方法對線粒體差異蛋白質(zhì)進行G

2、O功能富集分析和蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建。并對鼻咽癌5-8F細胞中表達上調(diào)的部分線粒體差異蛋白質(zhì)進行siRNA瞬時干擾，Transwell遷移實驗觀察細胞運動能力的變化。
　　結(jié)果:包括PRDX3和SOD2在內(nèi)的16種線粒體差異蛋白質(zhì)得到鑒定。在鼻咽癌5-8F細胞中抑制PRDX3的表達能夠提高細胞的運動能力。GO功能富集分析顯示生物學過程主要表現(xiàn)在細胞對活性氧應(yīng)答反應(yīng)、過氧化氫代謝過程、線粒體膜電勢調(diào)控、細胞氧化還原動態(tài)平衡和氧化還

3、原作用等5個方面;分子功能主要表現(xiàn)在氧化還原酶活性、半胱氨酸蛋白酶抑制劑活性、過氧化物酶活性、質(zhì)膜通道蛋白活性和抗氧化劑活性等5個方面。經(jīng)過數(shù)據(jù)挖掘，構(gòu)建了一個線粒體差異蛋白質(zhì)相互作用的網(wǎng)絡(luò)。結(jié)合腫瘤-間質(zhì)共演變假說的觀點進行分析，初步揭示了PRDX3、PRDX6、SOD2、ECH1、SERPINB5、COX5A、PDIA5、EIF5A、IDH3B和PSMC4等10種線粒體差異蛋白質(zhì)參與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的可能分子機制，為氧化應(yīng)激直接促進腫瘤轉(zhuǎn)