天然藥物防齲的物質(zhì)基礎研究——蜂房防齲有效成分的化學研究.pdf

1、一直以來，齲病的有效預防都是國內(nèi)外的研究重點。近年來，國內(nèi)外許多學者致力于天然藥物的防治齲病研究，本課題組在國內(nèi)外首次開展中藥防齲的系列研究，通過對11味中藥的防齲篩選實驗發(fā)現(xiàn)蜂房(NidusVespae)具有良好的防齲效能。在體外抑齲實驗中，即使在不影響各實驗菌株生長的較低濃度下也可有效抑制致齲菌的產(chǎn)酸，合成胞外多糖及早期黏附等致齲毒力因子，在生物膜模型中隨著蜂房提取物溶液的加入，顯著減少了變形鏈球菌在羥磷灰石片上黏附的量以及胞外基質(zhì)

2、的量，提示蜂房溶液的加入可能對菌斑的致齲化轉變有一定的抑制作用。本研究在前期研究的基礎上，采用現(xiàn)代的分離手段對蜂房的化學成分進行提取、分離和鑒定，研究蜂房化學成分對口腔細菌的生長、代謝、黏附作用，以及蜂房化學成分對牙體硬組織的作用，并采用先進的口腔生物膜模型，研究蜂房藥效成分對口腔細菌生物膜的作用，以此對蜂房的防齲物質(zhì)基礎進行系統(tǒng)研究。 方法：用現(xiàn)代的分離手段分離、提取和鑒定蜂房化學組分和化學單體，針對常見致齲菌的主要毒力因子進

3、行系統(tǒng)的體外抑齲實驗，評估蜂房化學成分對口腔常駐細菌生長、產(chǎn)酸、產(chǎn)糖及黏附的作用；利用pH循環(huán)模型評價蜂房化學成分對牙體硬組織的作用；定植4種口腔常駐菌于實驗系統(tǒng)中，并在穩(wěn)定的培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)以建立體外生物膜模型并對其進行系統(tǒng)測試；通過對模型恒流培養(yǎng)室中定時給以含4mg/ml藥物粗提物的蔗糖溶液，觀察實驗生物膜上活菌附著情況以及表面微結構，并連續(xù)觀察培養(yǎng)系統(tǒng)中的pH動態(tài)反應，觀察其對實驗生物膜的影響。 結果：1.本實驗分離得到

4、蜂房的5個化學組分(NVE1、NVE2、NVE3、NVE4、NVE5)和4個化學單體(ZWC1、ZWC2、β-谷甾醇、β-胡蘿卜甙)，并首次在蜂房中分離到β-谷甾醇和β-胡蘿卜甙；2.體外實驗證明蜂房提取物的抑齲能力較強，在不影響各實驗菌株生長的較低濃度下也可有效抑制產(chǎn)酸，產(chǎn)胞外多糖及早期黏附等致齲毒力因子，pH循環(huán)模型證實蜂房提取物NVE1對釉質(zhì)脫礦沒有明顯的抑制或促進作用；3.在生物膜模型中，與25mM蔗糖組相比，顯著減少了羥磷灰石