山茱萸有效成分的提取及相關(guān)基礎(chǔ)研究.pdf

1、山茱萸為山茱萸科木來木屬落葉小喬木Comus officinalis Sieb.et Zucc．干燥成熟果肉，具有補(bǔ)益肝腎、澀精固脫的功效。其中的五環(huán)三萜酸、皂苷等由于具有抗炎、抗病毒、抗氧化等多種生理活性日益受到重視，已被廣泛用作藥品、保健品和化妝品，成為臨床上最常用的名貴中草藥之一。河南有通過GAP認(rèn)證的全國最大的山茱萸生產(chǎn)基地，因此，深入研究其有效成分，綜合開發(fā)利用山茱萸，具有重要的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。 超臨界流體萃取技術(shù)

2、是一種新型、高效、潔凈提取分離技術(shù)。隨著“天然、營養(yǎng)、回歸自然”熱潮的興起，在天然產(chǎn)物的提取領(lǐng)域中占據(jù)了獨(dú)特的地位并倍受矚目。本文以河南南陽山茱萸為原料，對(duì)采用超臨界二氧化碳萃取山茱萸揮發(fā)油和皂苷工藝的可行性及其適宜條件進(jìn)行了深入研究和探討。 首先分別使用水蒸氣蒸餾法和不同條件的超臨界CO<,2>制備三個(gè)山茱萸揮發(fā)油樣品，并經(jīng)GC-MS分析其化學(xué)組成，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：水蒸汽蒸餾(SD)樣品的成分、顏色、香味與兩個(gè)超臨界樣品(SFE)有

3、很大不同，在SD樣品中檢出52種成分，烴類物質(zhì)含量高達(dá)27.83％；兩個(gè)SFE樣品分別檢出24和14種物質(zhì)，主要成分近似相同，都有高含量的鄰苯二甲酸單(2-乙基)己酯，含量分別為48.31％和45.50％，烴類物質(zhì)的數(shù)量和含量大大減少，表明超臨界提取的選擇性更高。 以萃取揮發(fā)油后的萃余物為原料，對(duì)超臨界二氧化碳萃取山茱萸總皂苷的工藝進(jìn)行了深入研究。重點(diǎn)考察了萃取溫度、萃取壓力、夾帶劑種類、夾帶劑用量、粒度、萃取時(shí)間、CO<,2>

4、流速等因素對(duì)皂苷提取率的影響，并確定了適宜的工藝條件。研究結(jié)果表明：最佳工藝條件是粒徑為0.2～0.3mm，壓力35MPa，溫度55℃，夾帶劑無水乙醇(v/w)0.75，CO<,2>流速8kg·h<'-1>，萃取時(shí)間為3.5h。在此條件下，超臨界CO<,2>萃取皂苷的含量是2.87mg·g<'-1>，與傳統(tǒng)工藝比較，超臨界流體萃取技術(shù)用于山茱萸皂苷的提取具有較明顯的優(yōu)勢。另外實(shí)驗(yàn)研究證明小試結(jié)果具有較好的工藝放大效果，顯示了超臨界流體萃

5、取山茱萸皂苷工藝良好的應(yīng)用開發(fā)前景。 分別采用乙醚、乙酸乙酯、乙醇為提取溶劑，對(duì)10批山茱萸藥材進(jìn)行索氏提取并以乙腈-甲醇-水為流動(dòng)相梯度洗脫，對(duì)提取液進(jìn)行HPLC指紋圖譜的分析。結(jié)果表明：其中11個(gè)峰是各批供試品所共有，共有峰總面積占總峰面積的90％以上，山茱萸藥材指紋圖譜技術(shù)參數(shù)的建立，為全面建立山茱萸藥材的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供了一定的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。從山茱萸的超臨界提取物中分離出了大量的齊墩果酸(OLA)，OLA在臨床上主要用于治療

6、急性黃疸型和慢性中毒型肝炎。但由于藥物水溶性差，溶出速度慢，其片劑的生物利用度很低。為了改善藥物的溶出，本文采用聚乙烯吡咯烷酮為載體，對(duì)齊墩果酸采用固體分散技術(shù)制備成OLA的固體分散體。DSC實(shí)驗(yàn)表明載體的存在使齊墩果酸晶型轉(zhuǎn)變，IR譜表明齊墩果酸和載體有部分氫鍵形成，溶出度實(shí)驗(yàn)表明，100 min時(shí)OLA固體分散體的累積溶出比原藥累積溶出高將近7倍，說明固體分散體技術(shù)使藥物的溶出得到顯著改善。 本文靜態(tài)法測定了齊墩果酸在超臨界