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1、目的:鼻息肉的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的多因素過(guò)程,細(xì)胞因子(cvtoKines CK)是其中重要因素,它們的調(diào)節(jié)機(jī)制十分復(fù)雜。本研究擬通過(guò)測(cè)定鼻息肉組織中核轉(zhuǎn)錄因子K B亞單位P50的表達(dá)及其活化狀態(tài)與IL-4、Y-IFN表達(dá)的關(guān)系,來(lái)探討P50對(duì)THl/TH2細(xì)胞因子表達(dá)調(diào)節(jié)的可能機(jī)制。 方法:選取自2004-2005年來(lái)本院手術(shù)的病人。實(shí)驗(yàn)組為行鼻息肉手術(shù)的病人。對(duì)照組選擇單純行鼻中隔偏曲矯正手術(shù)的病人,術(shù)前CT證實(shí)排除慢性鼻
2、竇炎。所有病人均按常規(guī)行經(jīng)鼻內(nèi)鏡手術(shù),以1%的卡因腎上腺素棉片表面麻醉3次后,中甲剪或鉤突刀切取息肉和鉤突黏膜,30分鐘內(nèi)以4%的多聚甲醛固定,常規(guī)石蠟切片,進(jìn)行HE染色和SP法免疫組織化學(xué)染色(鼠抗人NF-KBP50多克隆抗體,工作濃度1:150、Purified anti-human IL-4,工作濃度1:100、Purified anti-human Y-IFN,工作濃度1∶100),具體操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,用PBS代替一抗
3、作陰性對(duì)照,在高倍顯微鏡(10×40)下觀察陽(yáng)性染色細(xì)胞的分布和著色部位的情況,于切片的4個(gè)角及中央任選2個(gè)視野,進(jìn)行IL-4,Y-IFN,P50陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)算500個(gè)細(xì)胞中陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分率。以(胞核陽(yáng)性細(xì)胞數(shù))/(胞核陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)+胞漿陽(yáng)性細(xì)胞數(shù))×100%計(jì)算P50活性<'(1)>。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用SPSSll.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,對(duì)P50活性與IL-4,γ-IFN因子進(jìn)行直線相關(guān)分析。 結(jié)果:1.免疫組化分析發(fā)
4、現(xiàn),正常鼻黏膜中p50存在有低度表達(dá),其表達(dá)主要位于胞漿,而il-4,γ-ifn,)乙乎未見(jiàn)有表達(dá)。鼻息肉組織中p50表達(dá)明顯增強(qiáng),胞漿胞核均有陽(yáng)性表達(dá),主要位于上皮細(xì)胞,炎癥細(xì)胞及腺上皮細(xì)胞胞漿,p50活性顯著增強(qiáng),il-4表達(dá)亦明顯增強(qiáng).γ-ifn表達(dá)無(wú)明顯改變。 2.對(duì)40張鼻息肉切片組織中p50活性與il-4,γ-ifn表達(dá)進(jìn)行直線相關(guān)分析,發(fā)現(xiàn)p50與il-4呈直線正相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.70,p(0.001,提示兩
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