腎癌及癌旁組織蛋白質(zhì)組學(xué)的比較研究.pdf

1、腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma)起源于腎實(shí)質(zhì)，占成人惡性腫瘤的3﹪，全世界每年約有95000例死亡病例。因缺乏早期特異性診斷指標(biāo)，該病發(fā)現(xiàn)時往往已遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，出現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶病例的5年存活率不足5﹪。蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)從整體的角度研究細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)狀況，對研究腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移等起著重要作用。目前應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，已鑒別出對結(jié)腸直腸癌、肺癌、乳腺癌等惡性腫瘤的診斷、預(yù)后有指導(dǎo)意義的特異性蛋白。但對腎細(xì)胞

2、癌的研究報(bào)道甚少。本研究通過優(yōu)化雙向電泳技術(shù)體系，成功分離、檢測到患者腎癌及正常腎組織的差異蛋白質(zhì)，為疾病的早期診斷、轉(zhuǎn)移機(jī)制研究及有效藥物靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。 目的：建立腎癌及癌旁組織比較蛋白質(zhì)組學(xué)雙向電泳技術(shù)研究體系，尋找并鑒定腎癌患者癌組織的特異蛋白，為其發(fā)病機(jī)制提供線索，并為臨床診斷和治療提供依據(jù)。 方法：取病理證實(shí)的腎癌及癌旁組織相互對照，研磨、超聲裂解、抽提蛋白，采用固相pH梯度雙向凝膠電泳分離總蛋

3、白質(zhì)，凝膠經(jīng)銀染色后，Image Master 2DplatinlJm5.0圖像分析軟件進(jìn)行比較分析、識別差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜得到相應(yīng)的肽質(zhì)量指紋圖譜，然后搜索數(shù)據(jù)庫鑒定部分差異蛋白質(zhì)點(diǎn)． 結(jié)果：從雙向電泳圖譜上獲得蛋白質(zhì)斑點(diǎn)：腎癌組織1326±78個，癌旁組織1232±56個。篩選并鑒定出具有明顯差異的蛋白質(zhì)：氨基?；傅取?結(jié)論：本研究分析這些差異蛋白有助于尋找具有普遍性意義的腎癌標(biāo)