甲狀旁腺激素（PTH）介導(dǎo)的高轉(zhuǎn)換型腎性骨病的分子機(jī)理研究.pdf

1、腎性骨病(Renal Osteodystrophy,ROD)是慢性腎功能衰竭(CRF)常見、嚴(yán)重、治療困難的并發(fā)癥.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí),PTH對骨代謝具有雙相作用,即間歇給藥促進(jìn)成骨,而大劑量持續(xù)給藥則促進(jìn)骨吸收.在高轉(zhuǎn)換型腎性骨病時(shí),PTH異常增高,病理上以破骨細(xì)胞大量增生形成骨吸收陷窩為主要表現(xiàn).由于OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)參與了破骨細(xì)胞的活化和成熟,故高轉(zhuǎn)換型腎性骨病中,PTH的溶骨作用是否涉及OPG/RANKL/RANK系

2、統(tǒng)基因和蛋白質(zhì)表達(dá)的調(diào)控及其傳導(dǎo)通路,從而刺激破骨細(xì)胞活化導(dǎo)致的骨吸收,是該研究的目的.第一部分:高轉(zhuǎn)換型腎性骨病中骨保護(hù)素及其配體的表達(dá)和形態(tài)計(jì)量學(xué)觀察結(jié)果顯示:10例慢性腎衰尿毒癥患者經(jīng)骨病理學(xué)檢查證實(shí)均為高轉(zhuǎn)換型骨病,以破骨細(xì)胞活化形成骨吸收陷窩伴或不伴骨礦化不全為特點(diǎn).免疫組化顯示尿毒癥患者骨組織中以RANKL陽性表達(dá)為主.與正常對照相比,RANKL陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)目呈顯著增加趨勢,OPG陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)目呈顯著減少趨勢.骨組織形態(tài)

3、計(jì)量學(xué)分析顯示尿毒癥患者RANKL的陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)目與骨吸收面積和破骨細(xì)胞數(shù)目呈顯著正相關(guān).提示,高轉(zhuǎn)換型腎性骨病中,PTH的溶骨作用是通過OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)介導(dǎo)的.第二部分:人甲狀旁腺激素(hPTH)對體外培養(yǎng)胎鼠顱蓋骨成骨細(xì)胞增殖、分化和骨保護(hù)素及其配體表達(dá)的影響結(jié)果顯示:100ng/ml hPTH(1-34)在細(xì)胞培養(yǎng)的第5天顯著抑制成骨細(xì)胞的增殖;在細(xì)胞培養(yǎng)的第18天顯著抑制成骨細(xì)胞的分化;在整個(gè)細(xì)胞生長期均抑制O

4、PG基因和蛋白質(zhì)的表達(dá),但能明顯上調(diào)RANKL基因和蛋白質(zhì)的表達(dá),且最大效應(yīng)發(fā)生在成骨細(xì)胞的分化期.提示,OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)介導(dǎo)了PTH的溶骨作用,早期可能與OPG減少,而晚期與RANKL增加有關(guān).第三部分:人甲狀旁腺激素(hPTH)對調(diào)節(jié)骨保護(hù)素及其配體基因表達(dá)的PKA和PKC傳導(dǎo)通路影響的比較研究結(jié)果顯示:PKA通路抑制劑H-89 30umol/L能顯著改變100ng/ml hPTH(1-34)導(dǎo)致的OPG和RANKL