DAP12在阿爾茨海默癥中的功能研究.pdf

1、阿爾茨海默癥(Alzheimer's Disease，AD)是最常見的癡呆類神經(jīng)退行性疾病。近年來，越來越多的研究表明，作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的固有免疫效應(yīng)細(xì)胞，小膠質(zhì)細(xì)胞所介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在AD的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。在腦內(nèi)，DAP12(DNAX-activating protein of12kDa)作為重要的接頭蛋白分子介導(dǎo)TREM2、SIRPβ1、CR3等多種受體的胞內(nèi)信號傳導(dǎo)過程，參與炎癥、吞噬等過程。DAP12突變體缺失正常功

2、能后會導(dǎo)致Nasu-Hakola病(Nasu-Hakola Disease,NHD)。在AD病人腦內(nèi)，DAP12水平顯著上調(diào)，提示DAP12可能在AD發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用，但是目前其分子機(jī)制尚不清楚。因此，本研究以BV2小膠質(zhì)細(xì)胞作為研究對象，探討Dap12在細(xì)菌脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中的作用，及其對凋亡神經(jīng)元的吞噬功能的影響。我們發(fā)現(xiàn)，相對于星形膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)元，Dap12主要表達(dá)

3、于小膠質(zhì)細(xì)胞。盡管LPS顯著下調(diào)Dap12相關(guān)受體Trem2的mRNA水平，但是Dap12的轉(zhuǎn)錄水平并沒有顯著的改變。我們進(jìn)一步觀察Dap12是否影響小膠質(zhì)細(xì)胞對LPS刺激的敏感性，結(jié)果顯示:在Dap12被敲低后，細(xì)胞對于LPS刺激的反應(yīng)更為強(qiáng)烈，促炎因子白介素1(Interleukin-1β，IL-1β)、白介素6(Interleukin-1，IL-6)等顯著上調(diào)，與此同時，細(xì)胞內(nèi)JNK信號通路顯著激活。我們進(jìn)一步利用JNK抑制劑處理

4、BV2細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)該抑制劑可以顯著逆轉(zhuǎn)Dap12下調(diào)所導(dǎo)致的炎癥因子表達(dá)升高，而ERK抑制劑則沒有該效應(yīng)。這些結(jié)果提示:Dap12可特異性通過JNK信號通路對LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)產(chǎn)生抑制性影響。此外，我們還采用流式細(xì)胞分析技術(shù)探索Dap12在小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬凋亡N2a細(xì)胞過程中的作用，發(fā)現(xiàn)Dap12對細(xì)胞吞噬功能未產(chǎn)生顯著的影響。
　　綜上所述，本研究結(jié)果表明Dap12可以特異性通過JNK信號通路抑制LPS誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞的炎癥