涼潤通絡(luò)方對(duì)糖尿病胃輕癱大鼠胃腸激素的影響及其機(jī)理初探.pdf

1、目的：糖尿病胃輕癱是糖尿病的常見并發(fā)癥之一，其發(fā)生能夠影響降糖藥物及其他藥物的藥代動(dòng)力學(xué)，造成血糖不穩(wěn)定。目前西醫(yī)多采用胃腸動(dòng)力藥治療，但是停藥后易復(fù)發(fā)，且長期服用副作用較大。我們根據(jù)其陰虛燥熱血瘀的基本病機(jī)，制定涼潤通絡(luò)方，為明確該方劑改善糖尿病胃輕癱的療效及作用機(jī)制，采用鏈脲佐菌素(STZ)注射法制作糖尿病大鼠模型，通過運(yùn)用放免和免疫組化的方法，對(duì)血漿中MOT、SS、CCK進(jìn)行檢測，探討其對(duì)胃腸激素和胃腸內(nèi)分泌細(xì)胞的影響。

2、方法：68口、清潔級(jí)Wistar雄性大鼠，體重180～220g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、西沙必利治療組、涼潤通絡(luò)方治療組。采用腹腔注射STZ，制作糖尿病模型。模型成功后，不予降糖藥物控制，普通飼料正常喂養(yǎng)12周。第12周末，于各組隨機(jī)抽取2只大鼠，檢測胃排空率及小腸推進(jìn)率，證實(shí)已存在明顯胃輕癱改變。第13周起，分別給予蒸餾水、西沙必利水溶液、涼潤通絡(luò)方灌胃。6周后，停藥，禁食24h后，股動(dòng)脈取血，4℃離心，取血漿，采用放免法檢測

3、血漿中。MOT、SS、CCK的濃度；取胃竇組織、十二指腸組織，免疫組化檢測MOT、SS、CCK內(nèi)分泌細(xì)胞。 結(jié)果：如下所述。 1、與正常對(duì)照組相比，糖尿病各組各時(shí)段血糖明顯增高(P<0.01)；兩治療組相比各時(shí)段血糖無明顯變化(P>0.05)。 2、與同期飼養(yǎng)的正常對(duì)照組比較，糖尿病各組體重下降明顯(P<0.01)；與模型組相比，兩治療組體重在6周、12周時(shí)無明顯差異(P>0.05)；18周時(shí)，兩治療組體重較模

4、型組略有回升，有明顯差異(P<0.01)；兩治療組間比較，各時(shí)段體重?zé)o明顯差異(P>0.05)。 3、與正常對(duì)照組相比，糖尿病各組1周時(shí)攝食量明顯增加(P<0.01)；6周、12周、18周時(shí)攝食量均減少，有明顯差異(P<0.01.)。與模型組相比，兩治療組攝食量在1周、6周、12周時(shí)無顯著性差異(P>0.05)；18周時(shí)兩治療組攝食量明顯增加(P<0.01)。兩治療組相比，1周、6周、12周時(shí)無顯著性差異(P>0.05)；18周

5、時(shí)涼潤通絡(luò)組攝食量較西沙必利組為多(P<0.01)。 4、MOT濃度的比較與正常對(duì)照組比較，糖尿病各組大鼠血漿中MOT濃度均明顯升高。與模型組比較，涼潤通絡(luò)組血漿MOT濃度明顯下降(P<0.01)；西沙必利組亦有所下降(P<0.05)。兩個(gè)治療組比較，涼潤通絡(luò)組更加明顯(P<0.05)。 5、CCK濃度的比較與正常對(duì)照組比較，糖尿病各組血漿中CCK濃度明顯升高。與模型對(duì)照組比較，涼潤通絡(luò)組與西沙必利組血漿CCK濃度均明顯

6、下降(P<0.01)。兩個(gè)治療組比較，涼潤通絡(luò)組血漿CCK濃度明顯下降(P<0.05)。 6、SS濃度的比較與正常對(duì)照組比較，糖尿病各組血漿SS濃度明顯下降。與模型對(duì)照組比較，涼潤通絡(luò)組血漿SS濃度明顯升高(P<0.01)，西沙必利組血漿SS濃度亦有增高(P<0.05)。兩個(gè)治療組比較，涼潤通絡(luò)組血漿SS濃度明顯升高(P<0.01)。 7、小腸MOT內(nèi)分泌細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察：免疫反應(yīng)陽性的Mo細(xì)胞，胞

7、漿內(nèi)有淺棕色反應(yīng)物，胞核為陰性。主要分布于十二指腸腺上皮層及絨毛基底部上皮層，切面呈圓形、橢圓形、梭形、三角形等。(2)光鏡下Mo細(xì)胞測定：與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組Mo細(xì)胞數(shù)顯著下降，強(qiáng)陽性細(xì)胞率則增多(P<0.01)。涼潤通絡(luò)治療組和西沙必利組Mo細(xì)胞數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率均無顯著差異(P>0.05)；與模型組比較，涼潤通絡(luò)組和西沙必利組M o細(xì)胞數(shù)顯著增多，強(qiáng)陽性細(xì)胞率顯著減少(P<0.01)；兩個(gè)治療組比較Mo細(xì)胞數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率無

8、明顯差異(P>0.05)。 8、小腸CCK內(nèi)分泌細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察：免疫反應(yīng)陽性的Ⅰ細(xì)胞，胞漿內(nèi)有淺棕色反應(yīng)物，胞核為陰性。主要分布于十二指腸腺及腸絨毛上皮層，切面呈圓形、橢圓形、梭形、三角形等。(2)Ⅰ細(xì)胞測定：與正常對(duì)照組比較，糖尿病各組Ⅰ細(xì)胞數(shù)顯著增加。模型對(duì)照組、西沙必利治療組強(qiáng)陽性細(xì)胞率則顯著增高(P<0.01)，涼潤通絡(luò)治療組強(qiáng)陽性細(xì)胞率無顯著差異(P>0.05)。與模型組比較，涼潤通絡(luò)治療組Ⅰ細(xì)胞

9、數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率明顯下降(P<0.01)，西沙必利組Ⅰ細(xì)胞數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率無顯著差異(P>0.05)。兩個(gè)治療組比較，涼潤通絡(luò)組Ⅰ細(xì)胞數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率均顯著低于西沙必利組(P<0.05)。 9、胃竇SS內(nèi)分泌細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察：免疫反應(yīng)陽性的D細(xì)胞，胞漿內(nèi)有淺棕色反應(yīng)物，胞核為陰性，主要分布于胃竇粘膜的中、下層，偶見于上層，形態(tài)不規(guī)則。(2)D細(xì)胞測定結(jié)果：與正常對(duì)照組比較，糖尿病各組D細(xì)胞數(shù)顯著增高，強(qiáng)陽性細(xì)

10、胞率則顯著下降。與模型組比較，涼潤通絡(luò)組D細(xì)胞數(shù)顯著下降，強(qiáng)陽性細(xì)胞率顯著增高(P<0.01)，西沙必利組D細(xì)胞數(shù)及強(qiáng)陽性細(xì)胞率無明顯變化(P<0.05)；兩個(gè)治療組比較，涼潤通絡(luò)組D細(xì)胞數(shù)顯著下降，強(qiáng)陽性細(xì)胞率顯著增高(P<0.05)。 結(jié)論：1、本研究成功地利用STZ注射結(jié)合長時(shí)間喂養(yǎng)復(fù)制了糖尿病胃輕癱大鼠模型，且模型形成穩(wěn)定，價(jià)格低廉，操作方法比較簡單。2、認(rèn)為糖尿病胃輕癱的主要病機(jī)是陰虧燥熱血瘀，并制定了涼潤通絡(luò)方，經(jīng)實(shí)