涼潤(rùn)通絡(luò)方防治糖尿病胃腸功能障礙干預(yù)研究.pdf

1、目的：糖尿病(diabetesmellitusDM)為常見(jiàn)病，發(fā)病率逐年增高。糖尿病胃腸動(dòng)力障礙是糖尿病常見(jiàn)的并發(fā)癥，可累及全胃腸道。 目前西醫(yī)采用胃腸動(dòng)力藥如西沙必利、嗎叮啉、紅霉素等治療本病，近期療效顯著，但停藥易復(fù)發(fā)，且長(zhǎng)期服用副作用較大。 根據(jù)中醫(yī)學(xué)對(duì)“消渴”的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)和現(xiàn)代研究成果，我們制定了“涼潤(rùn)通絡(luò)”方劑，用于臨床，療效很好，為明確該方的改善糖尿病胃腸功能障礙的療效和機(jī)制，采用STZ注射制作了糖尿病大鼠模型

2、，通過(guò)對(duì)胃排空和小腸傳輸功能的檢測(cè)，證實(shí)了其對(duì)糖尿病大鼠的胃腸運(yùn)動(dòng)功能的改善； 方法：實(shí)驗(yàn)一糖尿病大鼠胃腸功能障礙模型的復(fù)制40只清潔級(jí)Wistar雄性大鼠，體重180～220g，將大鼠隨機(jī)分為4組，10只作為正常對(duì)照組(N組)，30只為糖尿病模型。糖尿病模型組分為Ⅰ組(飼養(yǎng)6周)、Ⅱ組(飼養(yǎng)12周)、Ⅲ組(飼養(yǎng)18周)，每組各10只。 實(shí)驗(yàn)二涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙影響的實(shí)驗(yàn)研究40只清潔級(jí)Wistar雄

3、性大鼠，體重180～220g，隨機(jī)分為：A組(模型空白對(duì)照組)、B組(涼潤(rùn)通絡(luò)治療組)、C組(西沙比利治療組)、正?？瞻讓?duì)照組(N組)。每組各10只。糖尿病模型制備同第一部分。模型成功后，不予降糖藥控制血糖。飼養(yǎng)6周后，給予藥物灌胃，(1)涼潤(rùn)通絡(luò)中藥組成及制作：生地20克、花粉20克、麥冬15克、烏梅6克、百合10克、白芍10克、木瓜10克、生石膏20克、當(dāng)歸10克、川芎10克、蒲黃10克、靈脂10克、元胡10克、荔枝核15克、黃連6

4、克、栝蔞12克、半夏10克、女貞子15克、旱蓮草15克、枳實(shí)10克、蘆薈0.3克。本院制劑室制成煎劑。1ml/100g，1次/日。(2)西沙比利為浙江京新制藥有限公司生產(chǎn)，5mg/片，1mg/Kg，1次/日。治療6周后，觀察胃內(nèi)殘留率、小腸推進(jìn)率。 第二部分涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃腸MOT、CCK、SS的影響40只清潔級(jí)Wistar雄性大鼠，體重180～220g，造模、分組、喂藥同第一部分實(shí)驗(yàn)二。停藥禁食24小時(shí)后，股動(dòng)脈取血，

5、置于抗凝管中混勻，4℃離心，取血漿； 第三部分涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃粘膜微循環(huán)及微血管超微結(jié)構(gòu)的影響32只清潔級(jí)Wjstar雄性大鼠，體重180～220g，造模、分組、喂藥同第一部分實(shí)驗(yàn)二。 第四部分涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃竇NO、NOS含量及eNOSmRNA表達(dá)的影響32只清潔級(jí)Wistar雄性大鼠，體重180～220g，造模、分組、喂藥同第一部分實(shí)驗(yàn)二。 第五部分涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病胃輕癱患者血清胃泌素及體表

6、胃電圖的影響2002年4月至2004年12月選擇本院門(mén)診和住院2型DM患者58例，其中門(mén)診35例，住院23例。 結(jié)果：第一部分涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)功能的影響實(shí)驗(yàn)一糖尿病胃腸功能障礙模型的復(fù)制1.與正?？瞻捉M血糖比較(6.43±1.27)，糖尿病6W、12W、18W模型組(22.04±5.06、23.16±5.48、22.78±6.02)明顯增高(P＜0.01)。 2.與正?？瞻捉M體重比較(215.55±13.5

7、1、231.5±16.05、260.74±21.38); 3.與正常空白組攝食量比較(14.64±3.02、14.98±2.99、15.57±3.14、15.86±3.40)，糖尿病模型組1W時(shí)(19.79±4.81)明顯增加(P＜0.01)； 4.胃排空比較：與正?？瞻捉M比較(13.2±9.4)，糖尿病6W組(14.1±10.3)胃內(nèi)殘留率增加， 5.小腸推進(jìn)率比較：與正?？瞻捉M比較(66.7±9.1)，糖尿病

8、6W組小腸推進(jìn)率下降(58.8±8.9)，但無(wú)明顯差異(P＞0.05)； 6.血糖與胃排空呈直線正相關(guān)(γ=0.61)，P＜0.01。血糖與小腸推進(jìn)率呈直線負(fù)相關(guān)(γ=-0.67)，P＜0.01。 實(shí)驗(yàn)二涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙影響的實(shí)驗(yàn)研究胃排空比較：與正?？瞻讓?duì)照組(13.2±9.4)比較，糖尿病模型組、中藥組、西藥組胃內(nèi)殘留率(45.0±8.1、25.4±8.1、26.1±11.2)明顯增多(P＜0.

9、01)；與糖尿病模型組比較，糖尿病中藥組、西藥組胃內(nèi)殘留率明顯減少(P＜0.05)；糖尿病兩個(gè)治療組比較，胃內(nèi)殘留率無(wú)明顯變化(P＞0.05)。 小腸推進(jìn)率比較：與正?？瞻讓?duì)照組(66.7±9.1)比較，糖尿病模型組、中藥組、西藥組小腸推進(jìn)率(34.6±6.6、48.9±7.2、46.8±8.1)明顯減少(P＜0.01)；與糖尿病模型組比較，糖尿病兩個(gè)治療組小腸推進(jìn)率明顯增加(P＜0.05)；糖尿病兩個(gè)治療組小腸推進(jìn)率比較無(wú)明顯

10、變化(P＞0.05)。 第二部分涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃腸MOT、CCK、SS的影響1各組大鼠血漿和組織中MOT含量的變化與正?？瞻捉M血漿和組織的MOT含量(26.23±5.61、234.00±84.50)比較， 2各組大鼠血漿和組織中CCK含量的變化與正?？瞻捉M血漿和組織的CCK含量(2.52±0.64、137.19±24.50)比較，糖尿病模型組(4.35±0.42、238.51±30.71)、中藥組(3.48±0.

11、86、168.97±28.93)、西藥組(4.74±0.75、240.22±29.25)明顯升高(P＜0.01，P＜0.05)；與模型組比較，中藥組CCK含量明顯下降(P＜0.05)，西藥組CCK含量無(wú)明顯變化(P＞0.05)； 3各組大鼠血漿和組織中SS含量的變化與正?？瞻捉M血漿和組織SS含量(27.05±6.23、325.50±69.53)比較，糖尿病模型組(11.63±3.41、547.12±84.50)、中藥組(19.2

12、7±4.66、431.43±72.38)、西藥組(12.87±3.94、549.35±88.14)血漿SS含量明顯下降，組織SS含量明顯升高(P＜0.01，P＜0.05)；與模型組比較，中藥組血漿SS含量明顯升高，組織SS含量明顯下降(P＜0.05)，西藥組血漿和組織SS含量無(wú)明顯變化(P＞0.05)。 4小腸MOT免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察免疫反應(yīng)陽(yáng)性的Mo細(xì)胞，胞漿內(nèi)有藍(lán)色反應(yīng)物，胞核為陰性。主要分布于十二指腸腺上皮層

13、及絨毛基底部上皮層，切面呈圓形、橢圓形、梭形、三角形等。(2)光鏡下Mo細(xì)胞測(cè)定與正常空白組Mo細(xì)胞數(shù)(43.2±4.7)、強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞率(26.3±3.8)比較，糖尿病模型組Mo細(xì)胞數(shù)(26.8±6.3)顯著下降，強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞率(33.8±3.5)則增多(P＜0.01)；中藥組和西藥組Mo細(xì)胞數(shù)(39.0±6.4、41.0±5.0)、強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞率(24.8±3.6、25.5±4.4)均無(wú)顯著差異(P＞0.05)；與模型組比較，中藥組和西藥

14、組Mo細(xì)胞數(shù)顯著增多，強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞率顯著減少，(P＜0.01)； 5小腸CCK免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察免疫反應(yīng)陽(yáng)性的Ⅰ細(xì)胞，胞漿內(nèi)有藍(lán)色反應(yīng)物，胞核為陰性。(2)Ⅰ細(xì)胞測(cè)定與正?？瞻捉MⅠ細(xì)胞數(shù)(215.2±15.2)、強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞率(131.8±8.3)比較， 6胃竇SS免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察免疫反應(yīng)陽(yáng)性的D細(xì)胞，胞漿內(nèi)有藍(lán)色反應(yīng)物，胞核為陰性，主要分布于胃竇粘膜的中、下層，偶見(jiàn)于上層。 第三部分涼

15、潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃粘膜微循環(huán)及微血管超微結(jié)構(gòu)的影響1各組大鼠GMBF的變化與正?？瞻捉MGMBF(159.22±50.52)比較; 2各組大鼠血液流變學(xué)變化比較本實(shí)驗(yàn)觀察了全血粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原、紅細(xì)胞聚集指數(shù)五項(xiàng)血流變指標(biāo)。 3各組大鼠胃粘膜微血管超微結(jié)構(gòu)變化糖尿病模型組微血管基底膜均有不同程度增厚。 第四部分涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病大鼠胃竇NO、NOS含量及eNOSmRNA表達(dá)的影響1各組大鼠

16、血清與組織NO含量比較與正?？瞻捉M血與組織NO含量(77.46±16.84、4.20±0.65)比較; 2各組大鼠血清與組織NOS含量比較與正?？瞻捉M血與組織NOS含量(3.65±0.38、6.99±0.88)比較; 3各組大鼠胃竇eNOSmRNA原位雜交檢測(cè)結(jié)果比較與正?？瞻捉M胃竇組織的eNOSmRNA比較，模型組、中藥組、西藥組表達(dá)增強(qiáng)(P＜0.01)； 4各組大鼠胃竇eNOSmRNART-PCR檢測(cè)結(jié)果與正

17、常空白組(0.1383±0.0566)比較; 第五部分涼潤(rùn)通絡(luò)方對(duì)糖尿病胃輕癱患者血清胃泌素及體表胃電圖的影響結(jié)果顯示： 結(jié)論：對(duì)實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果進(jìn)行系統(tǒng)分析后，可以得出以下結(jié)論：112周時(shí)糖尿病大鼠出現(xiàn)糖尿病胃腸功能障礙，胃排空及小腸傳輸功能均下降。血糖與胃排空呈直線負(fù)相關(guān)，與小腸推進(jìn)率呈直線負(fù)相關(guān)。涼潤(rùn)通絡(luò)方能夠改善糖尿病大鼠的胃排空和小腸傳輸功能，作用與西沙必利相當(dāng)。 212周時(shí)糖尿病大鼠出現(xiàn)胃腸激素的紊亂，涼