涼潤通絡方對糖尿病胃腸病變大鼠全血COHb含量及胃竇HO-2表達的影響.pdf

1、目的:
　　 糖尿病胃腸病變是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥，具有發(fā)病率高、病變范圍廣等特點，它不僅影響飲食物的消化吸收及降糖藥物的藥代動力學效力，造成血糖難以控制，而且影響患者的遠期預后。祖國醫(yī)學認為糖尿病屬于“消渴”范疇，我們根據(jù)其陰虛燥熱血瘀的基本病機，提出涼潤通絡方，臨床功效顯著。本研究旨在復制糖尿病胃腸病變大鼠模型的基礎上，測量胃腸推進率證實涼潤通絡方能夠改善胃腸動力功能障礙;通過檢測全血碳氧血紅蛋白(Carbon and o

2、xygen hemoglobin COHb)含量及胃竇組織血紅素氧合酶-2(Heme oxygenase-2，HO-2)蛋白陽性表達情況，探討涼潤通絡方通過保護胃腸道神經(jīng)系統(tǒng)改善胃腸道功能的可能機制。
　　 方法:
　　 封閉群健康無菌級成年雄性Wistar大鼠50只，180-220g，適應性喂養(yǎng)4天，隨機選取6只作為空白對照組(N)。將STZ溶液按55mg/Kg體重復制糖尿病大鼠模型，模型穩(wěn)定后將其隨機分為模型組(DM

3、)、甲鈷銨組(X)、涼潤通絡中劑量組(Z)及涼潤通絡高劑量組(G)各11只。成模后不予降糖藥物治療。普通飼料喂養(yǎng)，第5周起分別予生理鹽水、甲鈷銨溶液、中劑量涼潤通絡方、高劑量涼潤通絡方灌胃。12周后停藥，禁食24小時測胃腸推進率;取股動脈血檢測全血COHb含量;取胃竇組織，免疫組化檢測HO-2蛋白陽性表達情況。
　　 結果:
　　 1、動物脫落情況:44只Wistar大鼠注射STZ后有2只造模未成功，實驗過程中3只大鼠死

4、亡，共5只大鼠脫落于實驗。
　　 2、大鼠一般情況:與空白對照組大鼠相比，糖尿病組大鼠一般狀況較差。糖尿病大鼠12周時，涼潤通絡方高劑量組大鼠一般狀況明顯優(yōu)于糖尿病其它組別。
　　 3、血糖情況:與空白對照組相比，糖尿病各組各時間段血糖明顯增高（P＜0.01），糖尿病各組各時間段血糖無明顯差異(P＞0.05）。
　　 4、大鼠體重情況:與空白對照組相比，糖尿病大鼠各組各時段體重下降明顯（P＜0.01）。與模型組相

5、比，治療組體重6周略下降，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);12周時治療組體重明顯增高，有統(tǒng)計學差異(P＜0.01），各組間體重無明顯差異（P＞0.05）。
　　 5、大鼠攝食情況:與空白對照組相比，糖尿病大鼠1周、4周攝食量明顯增加（P＜0.01）;6周、12周攝食量減少(P＜0.05、P＜0.01)。與模型組相比，治療組1周、4周、6周攝食量無明顯變化(P＞0.05）;12周時治療組攝食量增加（P＜0.01）。與西藥組相比，涼潤

6、通絡中劑量組攝食量無明顯變化(P＞0.05）;高劑量組12周時增加(P＜0.05）。兩中藥組相比，12周時高劑量組攝食量高于中劑量組（P＜0.05）。
　　 6、大鼠血脂情況:各組大鼠血TC、TG、HDL、LDL無明顯差異，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）。
　　 7、大鼠胃腸推進率的比較:12周時與空白對照組相比，糖尿病大鼠胃腸推進率降低(P＜0.01）。與模型組比較，治療組胃腸推進率增高(P＜0.05）。與西藥組相比，涼

7、潤通絡中劑量組胃腸推進率無明顯變化(P＞0.05），高劑量組胃腸推進率增高(P＜0.05）。兩中藥組相比胃腸推進率無明顯變化(P＞0.05)。
　　 8、大鼠全血COHb含量的比較:12周時與空白對照組相比，糖尿病大鼠全血中COHb含量降低(P＜0.01）。與模型組比較，治療組COHb含量升高(P＜0.05）。與西藥組相比，涼潤通絡中劑量組COHb含量無明顯變化（P＞0.05）;高劑量組COHb含量明顯升高(P＜0.05)。兩中

8、藥組相比，COHb含量無明顯變化(P＞0.05）。
　　 9、胃竇組織HO-2免疫組化染色結果
　　 9.1、形態(tài)學觀察:染色組織定位于大鼠胃竇組織粘膜層細胞質(zhì)中，著色處可見大小不等的淺黃、深黃至棕黃色顆粒。細胞核為陰性，陰性結果為:無著色。與空白對照組相比，糖尿病大鼠免疫組化圖片著色淺、密度小。與模型組相比，治療組著色深、密度高。三個治療組中，涼潤通絡高劑量組著色深、密度高，西藥組與涼潤通絡中劑量組著色淺、密度小，二者

9、無明顯差別。
　　 9.2、平均光密度值測定結果:與空白對照組比較，糖尿病大鼠平均光密度值降低(P＜0.01）。與模型組比較，治療組平均光密度值升高(P＜0.05）。與西藥組相比，涼潤通絡中劑量組平均光密度值無明顯變化（P＞0.05）;高劑量組平均光密度值增高（P＜0.05）。兩中藥組相比，高劑量組平均光密度值增高(P＜0.01）。
　　 10、血糖與胃腸推進率、全血COHb含量及胃竇HO-2蛋白陽性表達呈負相關。

10、>　　 結論:
　　 1、采用STZ進行一次性腹腔注射復制糖尿病大鼠模型，糖尿病模型成功且穩(wěn)定。
　　 2、糖尿病大鼠12周時攝食量減少，胃腸推進率下降，全血COHb含量明顯降低，胃竇HO-2蛋白陽性表達降低，故推測CO-HO系統(tǒng)與糖尿病胃腸病變關系密切。
　　 3、糖尿病胃腸病變當屬“消渴”變證，針對其陰虛燥熱血瘀的病機，治則當滋陰清熱活血，我們提出涼潤通絡方，本實驗結果表明:涼潤通絡方能明顯改善糖尿病大鼠一