苯那普利對糖尿病腎病變大鼠腎組織中IGF-1和VEGF表達(dá)的影響.pdf

1、目的：糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病危害最大的微血管并發(fā)癥之一，流行病學(xué)研究表明，在美國，終末期腎臟病(ESRD)約1/3為糖尿病所致，且75％為2型糖尿病，我國約為5％。該病愈后差，致死率高，嚴(yán)重影響著人們的生活質(zhì)量。本實(shí)驗(yàn)通過大鼠腹腔內(nèi)一次性大劑量注射鏈脲佐菌素(STZ)構(gòu)建糖尿病動物模型，利用此模型研究胰島素樣生長因子-1(IGF-1)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在DN發(fā)生發(fā)展中的作用，并觀

2、察苯那普利對DN的保護(hù)作用。 方法：將72只健康雄性SD大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后制備模型。1.實(shí)驗(yàn)分組：分為對照組(A組，24只)，糖尿病模型組(B組，24只)，苯那普利治療組(C組，24只)，并分籠飼養(yǎng)。每組按標(biāo)本采集時(shí)間再分為3個(gè)小組，即4周組、8周組和12周組，每小組8只。2.糖尿病模型建立：將B組和C組一次性腹腔內(nèi)注射STZ 65 mg/kg(Sigma公司，用0.1 mol/L 檸檬酸緩沖液配制成2％溶液，pH4.5～5

3、)造成糖尿病模型，A組則予等量檸檬酸緩沖液腹腔內(nèi)注射。3.給藥方式：A組、B組予生理鹽水2ml/kg·d灌胃，C組予以苯那普利懸濁液(濃度為50％)10mg/kg.d灌胃。4.取材：標(biāo)本采集前一天分別用代謝鼠籠收集24 h尿，測定24小時(shí)尿白蛋白；當(dāng)天用3％水合氯醛4 ml/kg腹腔麻醉后大鼠稱重，下腔靜脈取血以留取血標(biāo)本，分離血清并測定血糖(Glu)；取雙腎，用冷鹽水沖洗、濾紙吸干血跡后稱重，去除被膜，取左側(cè)2/3腎臟置于10％福爾馬

4、林固定液中固定。5.觀察指標(biāo)及方法：記錄各組大鼠體重及腎重，算出腎重/體重比值；采用斷尾測血糖；24小時(shí)尿蛋白測定采用ELISA法檢測；應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測腎組織中IGF-1和VEGF的表達(dá)。結(jié)果：1.A組體重正常增長，B組大鼠的體重在4周時(shí)增長緩慢，與A組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，與C組無顯著差異。8周時(shí)B組體重?zé)o明顯變化，與A組和C組比較均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，12周時(shí)B組體重明顯減輕，與A組和C組比較有顯著

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(為P＜0.01)。2.B組腎重在4周、8周、12周均大于A組和C組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。3.腎重/體重，在不同的時(shí)間點(diǎn)，B組高于A組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)；在不同的時(shí)間點(diǎn)，C組低于B組，比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。4.成模后B組大鼠血糖明顯升高且持續(xù)保持高水平，而A組血糖始終正常，二者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。5.A組在各時(shí)間段比較IGF-1和VEGF表達(dá)均無顯著性差異，B組表達(dá)明顯強(qiáng)

6、于A組，在各時(shí)點(diǎn)與A組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，隨著病程進(jìn)展逐漸上升，B組各時(shí)間點(diǎn)比較均有差異(P＜0.01)，C組在各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)明顯輕于B組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。 結(jié)論：1.給大鼠腹腔注射STZ成功模擬了糖尿病模型，證實(shí)了DN血糖明顯升高、白蛋白尿增加、腎重/體重的升高以及腎臟病理改變。2.隨著DN進(jìn)展，腎組織IGF-1和VEGF表達(dá)逐漸增強(qiáng)，二者促進(jìn)了白蛋白的形成、腎小球肥大、腎間質(zhì)纖維化及腎小球硬化，