優(yōu)良乳酸菌的選育及在保育豬生產(chǎn)中的應(yīng)用研究.pdf

1、對豬樣品及東部地區(qū)苜蓿樣品中的乳酸菌進行系統(tǒng)的分類鑒定及理化性能研究；篩選具有較強抑菌活性、耐受人工胃腸液環(huán)境并快速產(chǎn)酸的優(yōu)良乳酸菌應(yīng)用于保育豬生產(chǎn)中，評價其對保育豬生長過程中排泄物及腸道微生物多樣性，以及對保育豬生長性能的影響。為抗生素低減型生豬生產(chǎn)找到了新的途徑，為乳酸菌添加劑的制作提供優(yōu)良的菌種。
　　根據(jù)乳酸菌的生理生化特征、16S rRNA基因序列分析，可以從豬樣品中一共分離到52株乳酸菌，這些菌株經(jīng)過鑒定，提示一共包括

2、了Lactobacillus reuteri, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus, Bifidobacterium, Lactobacillus salivarius, Weissella, Morganella morganii, Str

3、eptococcus alactolyticus, Enterococcus faecalis, Lactococcus lactis和Enterococcus在內(nèi)的14種乳酸菌菌種。通過雙層牛津杯平板法從這些菌株中篩選到2株對大腸桿菌、沙門氏菌及李斯特氏菌均有較強抑菌活性的乳酸菌P83和P84。對其抑菌活性物質(zhì)做初步分析的時候可以發(fā)現(xiàn)，兩株菌株的發(fā)酵上清液在排除酸和過氧化氫的作用后依然保持較強的抑菌活性；以上的結(jié)果表明P83和P84的

4、發(fā)酵上清液中除了酸和過氧化氫外，還可能存在著細菌素等抑菌活性物質(zhì)。
　　從我國東部河北，上海，遼寧，江蘇、山東和北京6個地區(qū)共收集到苜蓿樣品125份，并且從其中分離出242株的乳酸菌，采用雙層牛津杯法評定了這242株乳酸菌的抑菌活性，并且從中篩選出來了62株抑菌活性比較強的優(yōu)良的乳酸菌；對這62株乳酸菌進行16S rRNA基因序列分析發(fā)現(xiàn)，分離到的桿菌較少共13株，其中包括魏斯氏菌屬5株，共4個種：Weissella，Weisse

5、lla mino，Weissella confusa和Weissella viridescens；乳酸桿菌屬一共8株，一共有3個種：Lactobacillus curvatus，Lactobacillus sakei和Lactobacillus plantarum。分離到的球菌數(shù)量比較多，一共有49株球菌，其中包括了腸球菌屬9株，一共有4個種：Enterococcus faecalis，Enterococcus mundtii，Ente

6、rococcus和Enterococcus hirae；明串珠菌屬一共17株，一共有3個種：Leuconostoc，Leuconostoc citreum和Leuconostoc mesenteroides；戊糖片球菌屬一共9株，共1個種：Pediococcus pentosaceus；乳酸乳球菌屬一共14株，共3個種：Lactococcus lactis，Lactobacillus sakei和Lactococcus garvieae

7、；通過生理生化實驗以及人工模擬胃腸液實驗對這些乳酸菌的一些生長的特性和對胃腸液耐受的能力進行進一步研究，其中菌株ZZU A190在pH3.0～10.0,鹽濃度0～6.5％，人工腸液和人工胃液等條件下都表現(xiàn)出很強的耐受能力。
　　通過生理生化實驗、抑菌活性檢測實驗以及人工胃腸液耐受實驗，對從豬樣品和苜蓿樣品中分離到的及實驗室保存的乳酸菌進行篩選，篩選到抑菌活性較強和對人工胃腸液有較好耐受性能的菌株ZZU A190和ZZU A203作

8、為制備乳酸菌添加劑的菌種。將它們作為添加劑進行保育豬飼喂研究的結(jié)果顯示，抗生素或抗生素與乳酸菌發(fā)酵飼料聯(lián)合使用對保育豬糞便中乳酸菌的數(shù)量無顯著影響。單獨使用乳酸菌發(fā)酵飼料不僅能夠顯著增加保育豬糞便中乳酸菌的含量，而且使得糞便中大腸桿菌的數(shù)量顯著減少。這可能與抗生素的長期使用導(dǎo)致產(chǎn)生了致病菌的抗性菌株，致使腸道微生物菌群失調(diào)有關(guān)。與抗生素陰性對照相比，日糧中只添加乳酸菌發(fā)酵飼料或抗生素與乳酸菌發(fā)酵飼料聯(lián)合添加均可以顯著提高保育豬的日增重；