AML1基因發(fā)生斷裂融合事件的新檢測方法的建立及病例篩選.pdf

1、目的:建立一種簡便的方法快速篩選出AML1基因發(fā)生斷裂融合事件的病例，以尋找與AML1發(fā)生斷裂融合的新的伙伴基因。 方法:(1)應用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(reverse transcriptase-polymerase chain reaction，RT-PCR)檢測了AML1/ETO融合基因； (2)應用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應，結(jié)合電泳條帶灰度分析，以AML1基因上恒定表達的區(qū)域作為內(nèi)對照(C區(qū))，AML1基因斷裂位點發(fā)生區(qū)

2、域為B區(qū)，檢測了87例初治急性白血病患者和24例正常對照AML1基因的B/C比值。 結(jié)果:(1)87例初發(fā)急性白血病患者骨髓標本中，15例M2病例和1例M4病例AML1/ETO融合基因轉(zhuǎn)錄本陽性，陽性檢出率分別為39.47％(15/38)和3.57％(1/29)，總體陽性檢出率為18.4％(16/87)。24例正常對照標本全部為陰性。(2)AML1/ETO陽性組AML1基因B/C比值明顯低于對照組(P<0.001)； 87例初發(fā)

3、急性白血病患者31例B/C比值低于正常對照組，陽性檢出率為35.6％(31/87)。(3)31例B/C比值降低病例中16例與傳統(tǒng)RT-PCR方法檢測結(jié)果一致。檢測到可疑病例共15例，包括M1 1例，M2 3例，M4 7例，M5 2例，M6 1例，ALL 1例，可能攜帶新的"伙伴"基因。(4)可疑病例組CR率與AML1/ETO陰性且B/C比值正常組CR率分別為50％與53.3％，均低于AML1/ETO陽性組(78.6％)。但三組間緩解率比