青天葵及其組織培養(yǎng)物生藥鑒別和體外抗乙型肝炎病毒實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：對(duì)青天葵及其組織培養(yǎng)物進(jìn)行化學(xué)成分預(yù)試和紫外光譜分析，并比較其異同，為青天葵質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供生藥鑒別依據(jù)；對(duì)青天葵及其組織培養(yǎng)物和組織培養(yǎng)物各提取部位進(jìn)行體外抗乙型肝炎病毒藥效學(xué)研究；初步判斷組織培養(yǎng)物是否能作為青天葵資源加以利用。 方法：采用化學(xué)成分預(yù)試方法來檢識(shí)青天葵及其組織培養(yǎng)物所含化學(xué)成分類型并比較其異同；采用紫外光譜線組法以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水為溶劑，測(cè)定青天葵及其組織培養(yǎng)物紫外吸收，比較兩者吸收特征；以

2、2.2.15細(xì)胞為模型，加入藥物培養(yǎng)8d，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，結(jié)合MTT法確定最大無毒濃度；用酶聯(lián)免疫法(ELISA法)檢測(cè)青天葵水提液、青天葵組織培養(yǎng)物水提液和青天葵組織培養(yǎng)物各提取部位對(duì)2.2.15細(xì)胞分泌的e抗原(HBeAg)和表面抗原(HBsAg)抑制作用。結(jié)果：化學(xué)成分預(yù)試表明青天葵及其組織培養(yǎng)物均含有氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸等成分，所不同的是青天葵含有黃酮、酚、香豆素、內(nèi)酯、強(qiáng)心苷、植物甾醇和三萜類成分，組織培養(yǎng)物含有

3、皂苷類成分，特征性強(qiáng)，可作為二者生藥鑒別方法。 青天葵石油醚提取液在223.0nm、270.0nm、287.0nm有吸收峰，乙酸乙酯提取液在267.0nm、270.0nm、320.0nm有吸收峰，正丁醇提取液在223.0nm、255.0nm、262.0nm有吸收峰，水提取液紫外無吸收。青天葵組織培養(yǎng)物石油醚提取液在222.0nm、272.0nm有吸收峰，乙酸乙酯提取液在270.0nm、276.0nm、285.0nm有吸收峰，正丁

4、醇提取液在223.0nm、262.0nm有吸收峰，水提取液在258.0nm、361.0nm、394.0nm有吸收峰。二者石油醚提取液在223.0±1.0nm和270.0±2.0nm、乙酸乙酯提取液在270.0nm、正丁醇提取液在223.0nm和26.0nm有相同吸收峰，青天葵水提取液紫外無吸收，而組織培養(yǎng)物水提取液紫外有吸收。紫外光譜特征性強(qiáng)，也可作為二者生藥鑒別方法。 青天葵水提液對(duì)HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，對(duì)HB

5、eAg抑制作用強(qiáng)于對(duì)HBsAg抑制作用；青天葵組織培養(yǎng)物水提液對(duì)HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，對(duì)HBsAg抑制作用強(qiáng)于對(duì)HBeAg抑制作用；青天葵組織培養(yǎng)物乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位對(duì)HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，對(duì)HBsAg抑制作用強(qiáng)于對(duì)HBeAg抑制作用。 結(jié)論：本研究首次采用化學(xué)成分預(yù)試和紫外光譜線組法對(duì)青天葵及其組織培養(yǎng)物進(jìn)行生藥鑒別研究，并以2.2.15細(xì)胞為模型，對(duì)青天葵及其組織培養(yǎng)物及組織培養(yǎng)