乙肝轉陰散抗乙型肝炎病毒的實驗研究.pdf

1、目的:觀察乙肝轉陰散（YGZYS）體外抗乙型肝炎病毒（HBV）和體內抗鴨乙型肝炎病毒（DHBV）的作用，為研究和開發(fā)新的抗乙肝藥物提供理論及實驗依據(jù)。
　　方法:(1)體外抗HBV的作用:采用MIT法檢測YGZYS對HBV基因轉染的HepG2.2.15細胞的半數(shù)毒性濃度(TC50)和最大無毒濃度(TC0);采用直接加藥法觀察不同濃度藥物在最大無毒濃度(TC0)的基礎上對HepG2.2.15細胞的抑制作用;采用血清藥理學法觀察不同濃

2、度含藥血清對HepG2.2.15細胞的抑制作用，分別在第4 d和第8d收集細胞培養(yǎng)上清液，采用ELISA法測定上清液HbsAg和HBeAg的滴度，用FQ-PCR法檢測上清液HBV DNA的含量。(2)體內抗DHBV的作用:采用1日齡廣西麻鴨感染DHBV，13 d后用PCR法篩選出DHBV強陽性鴨。隨機分成5組:YGZYS高、中、低3個劑量組、以生理鹽水灌胃的模型組和以拉米夫定(3TC)灌胃的陽性對照組。每組10只，各組雛鴨均灌胃14d。

3、于用藥前(T0)、用藥7d(T7)、14 d(T14)及停藥后3d(P3)分別采血，采用ELISA法測定血清HBsAg或HBeAg的滴度，用FQ-PCR法檢測血清DHBVDNA的含量。同時檢測血清的轉氨酶ALT和AST，并觀察肝組織病理學變化。
　　結果:(1)體外抗HBV的作用:①YGZYS對HepG2.2.15細胞毒性較低，TC50為5.386 mg/ml，TC0為0.736 mg/ml。②無毒濃度和不同濃度含藥血清的YGZY

4、S在HepG2.2.15細胞培養(yǎng)中可有效地抑制細胞HbsAg和HBeAg的分泌以及HBV DNA的合成，抑制作用有明顯的量效和時效反應關系。③TI均大于2，為高效低毒的抗HBV藥物。(2)體內抗DHBV的作用:YGZYS各劑量組用藥后血清DHBV DNA滴度顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，停藥3d后，中、低劑量組和陽性組血清DHBV DNA有明顯回升現(xiàn)象，而高劑量組DHBV DNA回升現(xiàn)象不明顯。與模型組比較，YGZYS各劑量組