乙型肝炎病毒x基因克隆及其表達(dá).pdf

1、目的:HBx(Hepatitis B x-protein)是乙型肝炎病毒基因組x區(qū)所編碼,具有多種生物活性的蛋白質(zhì).目前研究表明,HBx與乙型肝炎病毒感染宿主細(xì)胞的過(guò)程有關(guān),并參與介導(dǎo)體內(nèi)特異性和非特異性免疫過(guò)程,使肝細(xì)胞受損,此外研究還發(fā)現(xiàn)HBx與肝細(xì)胞癌(HCC,Hepatocyte Carcinoma)的發(fā)生關(guān)系密切,但具體機(jī)制尚存在爭(zhēng)議.為了更好的了解HBx在體內(nèi)、體外的多種生物學(xué)作用,闡明其在HCC形成過(guò)程中所發(fā)揮作用的機(jī)理,

2、構(gòu)建乙型肝炎病毒x基因表達(dá)載體,獲得其表達(dá)產(chǎn)物x蛋白就顯的尤為必要.該研究即以此為立題依據(jù),目的是克隆乙型肝炎病毒基因組中的x開(kāi)放讀碼區(qū)(即x基因),并構(gòu)建其原核表達(dá)載體,而后將其導(dǎo)入大腸桿菌,誘導(dǎo)其表達(dá),以期獲得x基因的表達(dá)產(chǎn)物x蛋白,為后續(xù)進(jìn)一步研究其生物學(xué)活性及其在HCC發(fā)生過(guò)程中的作用奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).結(jié)論:通過(guò)設(shè)計(jì)合適的引物,可成功的對(duì)乙型肝炎病毒x開(kāi)放讀碼區(qū)(x基因)進(jìn)行擴(kuò)增,并可根據(jù)需要在相應(yīng)的上下游引物5′端引入限制性?xún)?nèi)切酶