雙重濾過血漿置換清除乙型肝炎病毒體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　本研究旨在通過體外實(shí)驗(yàn)探討DFPP降低外周血中HBV-DNA及HBsAg的程度，以及不同血漿循環(huán)量與病毒顆粒清除率之間的關(guān)系。
　　方法：
　　收集天津市傳染病醫(yī)院ICU病房經(jīng)PE置換出的含有HBV的血漿共5500mL，并加入肝素抗凝。分別用三種不同孔徑的血漿成分分離器(EC30W：膜孔徑φ20-25nm；EC40W：膜孔徑φ25-35nm；EC50W：膜孔徑φ35-37nm)各濾過1000mL的血漿，取濾

2、過前血漿以及回收液和棄液各3mL，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)HBV-DNA定量，應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)HBsAg，應(yīng)用東芝120全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALB和GLB，以選出適合本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行DFPP的血漿成分分離器；再用上述選擇的分離器濾過2500mL的血漿，共循環(huán)濾過5000mL，取濾過前血漿及每循環(huán)濾過1000mL后的循環(huán)液和棄液各3mL，分別檢測(cè)HBV-DNA定量、HBsAg、ALB、GLB，以了解不同血

3、漿循環(huán)濾過量與病毒顆粒清除率之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.用EC30W、EC40W、EC50W三種不同孔徑的血漿成分分離器分別濾過1000mL血漿，濾過前血漿中的HBV-DNA定量為3.0×105copies/mL，HBsAg含量為5102COI；濾過后，回收液中的HBV-DNA均檢測(cè)不到；HBsAg含量也明顯下降，三種分離器對(duì)HBV顆粒和HBsAg的濾過率均接近于0。
　　2.用EC30W、EC40W、EC50W

4、三種不同孔徑的血漿成分分離器濾過后，回收液中HBsAg含量分別為1.1COI、1.18COI、34.64COI，EC50W血漿成分分離器濾過后回收液中的HBsAg含量較EC30W和EC40W血漿成分分離器明顯增加。
　　3.用EC30W、EC40W、EC50W三種不同孔徑的血漿成分分離器分別濾過1000mL血漿，濾過前血漿中的ALB為22.2g/L，GLB為17.2g/L，濾過后回收液中的ALB分別為14.5g/L、17g/L和2

5、0.6g/L，GLB分別為4.3g/L、7.4g/L和12.3g/L。
　　4.應(yīng)用EC40W血漿成分分離器循環(huán)濾過5L血漿后，HBV顆粒的清除率分別為66.22％、74.10％、81.42％、92.84％和94.37％；血漿HBsAg的清除率分別為45.39％、64.31％、80.45％、88.27％和90.57％；ALB的丟失率分別為23.61％、25.23％、22.49％、32.44％和34.64％。GLB的丟失率分別為45

6、.93％、43.95％、43.56％、58.00％和61.38％。
　　結(jié)論：
　　1.經(jīng)本實(shí)驗(yàn)所選的三種不同孔徑的血漿成分分離器濾過后，回收液中的HBV顆粒和HBsAg含量均明顯下降，但是隨著分離器孔徑的增大，回收液中HBsAg含量明顯增加，這與分離器的孔徑和HBV顆粒以及HBsAg的直徑有關(guān)。
　　2.隨著血漿成分分離器孔徑的增大，回收液中ALB和GLB的含量逐漸增加，由于ALB的分子量較GLB小，所以在DFPP過

7、程中，濾過膜對(duì)ALB的濾過率較GLB大。
　　3.用EC40W血漿成分分離器濾過血漿時(shí)，隨著血漿濾過循環(huán)量的不斷增加，HBV顆粒、HBsAg的清除率不斷增加，但是對(duì)于血漿中高載量的HBVDNA以及HBsAg來說，要想使其降到理想水平，需要進(jìn)行多次DFPP治療才可能完成。
　　4.用EC40W血漿成分分離器濾過血漿時(shí)，隨著濾過循環(huán)量的不斷增加，ALB和GLB的丟失率保持平穩(wěn)，所以在本實(shí)驗(yàn)中用EC40W血漿成分分離器濾過血漿濾過