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1、目的: 1.探討有熱缺血的供肝膽道耐受冷保存的安全時(shí)限,為臨床肝移植術(shù)后早期肝內(nèi)外膽管不可逆性壞死和原發(fā)性移植肝無(wú)功能的防范提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 2.探討有熱缺血的供肝膽道冷缺血損傷機(jī)制。 3.探討冷保存后供肝膽道灌注液中酶系變化與膽道缺血性損傷的關(guān)系,為植入前評(píng)價(jià)供肝質(zhì)量尋求一種可能的方法。 方法:以健康雄性SD大鼠為研究對(duì)象。 1.建立大鼠肝移植的供肝切取的動(dòng)物模型,切取供肝后0-4℃冷保存。
2、 2.將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為7組,每組動(dòng)物8只,分別在冷保存0h、4h、8h、12h、16h、20h、24h時(shí)?。孩倌懙拦嘞匆簶?biāo)本2ml:檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT);②供肝膽總管:檢測(cè)膽管組織Na+,K+ATP酶活力,病理檢查觀察膽管組織損傷程度,并進(jìn)行形態(tài)學(xué)量化評(píng)分;③供肝組織:做石蠟切片病理檢查。 3.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果: 1.在熱缺血
3、10分鐘情況下,大鼠供肝膽道灌洗液中肝臟酶系指標(biāo)(ALT、AST、ALP和GGT)隨冷保存時(shí)間延長(zhǎng)而升高,與冷保存早期(<12h)各組相比,冷保存12h后各組顯著升高(P<0.01)。 2.隨保存時(shí)間的延長(zhǎng),供肝膽管組織Na+,K+-ATP酶活力顯著下降,各組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01); 3.供肝組織病理檢查發(fā)現(xiàn)供肝隨保存時(shí)間的延長(zhǎng),膽管組織損傷程度逐漸加重,病理形態(tài)學(xué)評(píng)分示與冷保存早期(<12h)比較,冷保存
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