甲氨蝶呤對大鼠輸卵管的損傷及四氫葉酸保護效應(yīng)的實驗研究.pdf

1、目的： 探討甲氨蝶呤對大鼠輸卵管的組織學(xué)、超微結(jié)構(gòu)及雌孕激素受體的損傷性效應(yīng)和四氫葉酸鈣對其損傷性改變的保護效應(yīng)，以及可能的量效關(guān)系。 方法： 以PMSG、HCG制作假孕大鼠動物模型，80只SD雌性大鼠，皮下注射PMSG50u，48小時后再次皮下注射HCG100u，然后隨機分為A組和B組，每組40只。A、B兩組再隨機分成4小組，分別定義為A0、A1、A2、A3和B0、B1、B2、B3。A0組和B0組設(shè)為陰性對照組

2、(生理鹽水0.5ml ip)，A1組和B1組MTX1mg/kg ip，A2組和B2組MTX2mg/kg ip， A3組和B3組MTX5mg/kg ip。B組大鼠注射MTX24小時后用CF解救，CF的量為MTX的1/10，B0組再次生理鹽水0.5ml ip。兩組大鼠10天后處死取雙側(cè)輸卵管壺腹部組織，留取標(biāo)本。每組選一標(biāo)本的一側(cè)輸卵管送電鏡觀察。其余10％多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，制成5μm厚的切片。分別HE染色及雌、孕激素受體的免疫組

3、化染色。 結(jié)果： 1、光鏡下觀察結(jié)果： A1組、A2組、A3組標(biāo)本中均出現(xiàn)輸卵管間質(zhì)水腫、炎癥細(xì)胞浸潤，并隨MTX劑量增大而加重，且A3組中炎癥細(xì)胞浸潤至輸卵管上皮全層。A0及B組標(biāo)本均未見明顯異常。 2、透視電鏡下觀察結(jié)果：MTX處理后的A組輸卵管標(biāo)本中，均出現(xiàn)上皮細(xì)胞纖毛消失或減少，纖毛細(xì)胞內(nèi)線粒體水腫、空泡形成及結(jié)晶樣物質(zhì)形成；細(xì)胞核固縮；無纖毛細(xì)胞頂部的分泌顆粒代償性增加，并隨MTX劑量增大而加重。B3組

4、輸卵管標(biāo)本也可見以上變化，但程度較A3組輕。而A0、B0、B1、B2組則無明顯改變。 3、免疫組化結(jié)果： (1)A組、B組的ER陰性表達(dá)率分別為35.0％(14/40)和12.5％(5/40)，行四格表卡方檢驗有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 (2)A組的ER陽性表達(dá)在不同劑量組的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，表現(xiàn)為隨著MTX劑量的增加，ER陽性表達(dá)下降；B組的ER陽性表達(dá)在不同劑量組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>

5、0.05)。 (3)A、B兩組相同劑量的小組進(jìn)行比較，示2 mg/kg組和5 mg/kg組ER表達(dá)存在明顯差異(P均<0.05)，B組的ER陽性表達(dá)率較A組明顯有增加。 (4)A組的PR陽性表達(dá)在不同劑量組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但A0、A3比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；B組的PR陽性表達(dá)在不同劑量組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(>0.05)。 (5)A、B兩組相同劑量的小組進(jìn)行比較，PR表達(dá)均不存在明

6、顯差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1、MTX對大鼠輸卵管膜的光鏡下?lián)p傷主要是炎癥細(xì)胞浸潤，并可以通過CF解救而避免。 2、MTX對大鼠輸卵管損傷的電鏡下超微結(jié)構(gòu)的損傷是隨著劑量的增加而加重，但低劑量組的損傷可以通過CF解救而避免，大劑量組的損傷即使CF解救也不能避免。 3、MTX對大鼠輸卵管的ER表達(dá)有損傷，并且隨劑量增加而加重，但可以通過CF解救而避免。 4、MTX對大鼠輸卵管PR的損傷尚不能確