依達(dá)拉奉對C57BL小鼠帕金森病模型神經(jīng)元的保護(hù)作用.pdf

1、目的：⑴建立敞箱實(shí)驗(yàn)分析系統(tǒng)，用于評估帕金森病小鼠模型的自主運(yùn)動行為；⑵通過對比依達(dá)拉奉治療前后C57BL小鼠帕金森病模型行為學(xué)、神經(jīng)病理學(xué)指標(biāo)的變化，探討依達(dá)拉奉對C57BL小鼠帕金森病模型神經(jīng)元的保護(hù)作用。⑶通過分析行為學(xué)動態(tài)變化規(guī)律，探討用藥最佳時(shí)機(jī)。
　　方法：①以數(shù)碼攝像頭和PC機(jī)為基礎(chǔ)，應(yīng)用Matlab結(jié)合數(shù)字圖像處理技術(shù)獲取曠場實(shí)驗(yàn)視頻中小鼠質(zhì)心坐標(biāo)、繪制小鼠運(yùn)動軌跡并計(jì)算相應(yīng)運(yùn)動參數(shù)，將計(jì)算結(jié)果與常規(guī)人工計(jì)數(shù)方法相

2、比較。②健康雄性C57BL/6小鼠30只，隨機(jī)分成正常對照組、模型組及依達(dá)拉奉治療組。模型組和依達(dá)拉奉治療組給予腹腔注射百草枯（Paraquat，PQ）和代森錳（Maneb，MN）建立PD模型。觀察PD小鼠行為學(xué)動態(tài)改變及中腦黑質(zhì)超微結(jié)構(gòu)的變化。③建模成功后，治療組給予依達(dá)拉奉腹腔注射2周。對比治療前、后行為學(xué)、中腦多巴胺神經(jīng)元數(shù)量，以及中腦Caspase-3、Bcl-2表達(dá)量的變化。
　　結(jié)果：⑴成功建立敞箱實(shí)驗(yàn)分析系統(tǒng)，經(jīng)傳統(tǒng)

3、計(jì)分方法驗(yàn)證，結(jié)果可靠；⑵聯(lián)合PQ與MN誘導(dǎo)C57BL/6小鼠PD模型，在給藥第一周，爬桿實(shí)驗(yàn)、懸掛實(shí)驗(yàn)無明顯變化，第二周輕度降低，第三周開始急劇下降，隨后第4至第6周有輕度變化，但無顯著差異；敞箱實(shí)驗(yàn)則顯示從第一周到第三周持續(xù)降低，以第二周最為顯著，隨后第4至第6周有輕度變化，但無顯著差異；⑶PD模型組C57BL/6小鼠嗅覺功能減退；⑷透射電鏡結(jié)果顯示，與正常對照組相比，模型組胞質(zhì)中大量細(xì)胞器退變，胞質(zhì)空泡化，核周間隙增寬，核染色質(zhì)濃

4、縮、邊聚，溶酶體數(shù)量增加，線粒體腫脹，嵴呈不同程度的斷裂溶解，部分線粒體呈空泡樣變，高爾基復(fù)合體擴(kuò)張、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹，數(shù)量減少，脫顆粒，髓鞘剝離現(xiàn)象明顯。⑸C57BL/6小鼠PD模型，黑質(zhì)TH陽性神經(jīng)元數(shù)量顯著降低，凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3表達(dá)上調(diào)，Bcl-2表達(dá)下調(diào)。⑹依達(dá)拉奉治療后。懸掛實(shí)驗(yàn)、爬桿實(shí)驗(yàn)及敞箱實(shí)驗(yàn)顯著改善，黑質(zhì) TH陽性神經(jīng)元數(shù)量顯著增加，凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3，Bcl-2表達(dá)部分恢復(fù)。
　　結(jié)論：