不同限制性輸液方案復(fù)蘇孕兔非控制性失血性休克的研究.pdf

1、背景： 對急性產(chǎn)科出血性休克病人，容量復(fù)蘇是院前生命高級支持系統(tǒng)的重要組成部分。近年來，大量的臨床和動物實驗證明出血未控制前不適當?shù)囊后w復(fù)蘇可能惡化休克的結(jié)局，一些有關(guān)創(chuàng)傷性失血性休克早期救治臨床實踐指南和部分國家的治療規(guī)范已從傳統(tǒng)的快速輸液復(fù)蘇轉(zhuǎn)向一個更為理性、明智的限制性輸液復(fù)蘇治療。 第一章：不同限制性輸液方案對孕兔非控制性失血性休克微循環(huán)的影響 [目的]：失血性休克治療后出現(xiàn)大循環(huán)和微循環(huán)血流不一致的分離

2、現(xiàn)象，治療后毛細血管無復(fù)流使功能毛細血管密度(FCD)下降，F(xiàn)CD的恢復(fù)是決定休克預(yù)后的重要指標。 [方法]： 1、建立孕兔失血性休克模型及微循環(huán)耳窗模型：經(jīng)過麻醉動物、備皮、頸動靜脈插管、耳窗制作術(shù)后，沿下腹部正中切口打開腹腔，暴露子宮，制作孕兔失血性休克模型。模型分為4期： ①基礎(chǔ)期(Basestage,0min)麻醉、插管、耳窗制作。 ②急性失血期(Shockstage,0～30min)：選取孕兔任

3、意一孕囊，剪斷此孕囊下方子宮系膜處的一處直徑約3-4mm的動脈切斷，使用無菌紗布圍繞(便于統(tǒng)計出血量)， ③院前復(fù)蘇期(Prehospitalstage，30~90min)：急性失血期后的30～90min期間。根據(jù)預(yù)先設(shè)定的輸液方案給予搶救。 ④院內(nèi)復(fù)蘇期(Hospitalstage,90～180min)：當實驗進行至90min后，縫扎血管徹底止血，回輸血液和繼續(xù)輸液治療以維持MAP在80mmHg，第180min分鐘停止

4、實驗拔除各插管縫合傷口觀察生存一周情況。 2、實驗分組：選擇妊娠期為15~25天新西蘭孕兔30只，將實驗動物編號隨機分為3組： ①傳統(tǒng)復(fù)蘇組(NSresuscitation，NS)：院前復(fù)蘇期開始接受大量的生0理鹽水(NS)及林格氏液(RS)快速輸注以維持MAP在80mmHg左右； ②限制性輸液復(fù)蘇組(NShypotensionresuscitation，NH)：院前復(fù)蘇期開始接受小量RS輸注以維持MAP在60m

5、mHg左右； ③高滲高膠限制性輸液復(fù)蘇組(hypertonichyperosmotichypotensionresuscitation，HHH)：院前復(fù)蘇期開始接受小量HHES(萬汶+7.5％氯化鈉，4ml/kg)及RS輸注以維持MAP在60mmHg左右； 3、監(jiān)測指標：于實驗0min、30min、90min、180min并抽血檢測BE、PH、PCO2、PO2和HCT水平，連續(xù)監(jiān)測MAP及微循環(huán)情況。 [結(jié)果]：

6、 1.不同復(fù)蘇方式孕兔pH，BE，P02，PCO2的變化：休克后出現(xiàn)代償性的過度呼吸，表現(xiàn)為動脈血PCO2、pH、BE的下降和PO2的上升， 2.不同復(fù)蘇方式孕兔微動脈、微靜脈直徑比較：休克后微動脈、微靜脈分別收縮至基礎(chǔ)期0.63±0.54％和0.77±0.67％，復(fù)蘇后微動脈直徑恢復(fù)， 3.不同復(fù)蘇方式孕兔功能性毛細血管密度(FCD)數(shù)目比較：休克后各組FCD數(shù)目減少到基礎(chǔ)期的42.57±5.5％，院前復(fù)蘇后，

7、FCD漸恢復(fù)，在T90min各組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義(F=40.150，P=0.000)。 4.不同復(fù)蘇方式孕兔失血量、補液量、HCT、生存時間比較： [結(jié)論]：不同的液體復(fù)蘇方式和種類對休克后微循環(huán)的恢復(fù)和系統(tǒng)代謝產(chǎn)生不同的影響。 第二章：不同限制性輸液方案對孕兔非控制性失血性休克肺損傷的保護作用 [目的]： 休克后由中性粒細胞激活誘發(fā)的免疫反應(yīng)是組織損傷的重要階段，中性粒細胞和其它巨噬細胞的激活

8、引起組織損傷，最終至器官功能的障礙。 [方法]： 1、建立孕兔失血性休克模型模型：經(jīng)過麻醉動物、備皮、頸動靜脈插管后，沿下腹部正中切口打開腹腔，暴露子宮，制作孕兔失血性休克模型。模型分為4期： ①基礎(chǔ)期(Basestage,0min)麻醉、插管。 ②急性失血期(Shockstage,0～30min)：選取孕兔任意一孕囊，剪斷此孕囊下方子宮系膜處的一處直徑約3-4mm的動脈切斷，使用無菌紗布圍繞(便于統(tǒng)計出

9、血量)， ③院前復(fù)蘇期(Prehospitalstage，30~90min)：急性失血期后的30～90min期間。根據(jù)預(yù)先設(shè)定的輸液方案給予搶救。 ④院內(nèi)復(fù)蘇期(Hospitalstage，90～180min)：當實驗進行至90min后，縫扎血管徹底止血，回輸血液和繼續(xù)輸液治療以維持MAP在80mmHg，第180min分鐘停止實驗。 2、實驗分組：選擇妊娠期為15～25天新西蘭孕兔18只，將實驗動物編號隨機分為3

10、組： ①傳統(tǒng)復(fù)蘇組(NSresuscitation，NS)：院前復(fù)蘇期開始接受大量的生理鹽水(NS)及林格氏液(RS)快速輸注以維持MAP在80mmHg左右； ②限制性輸液復(fù)蘇組(NShypotensionresuscitation，NH)：院前復(fù)蘇期開始接受小量RS輸注以維持MAP在60mmHg左右； ③高滲高膠限制性輸液復(fù)蘇組(hypcrtonichyperosmotichypotensionresuscit

11、ation，HHH)： 3、監(jiān)測指標：于實驗0min、30min、90min、180min抽血檢測血漿PAF水平， [結(jié)果]： 1.不同復(fù)蘇方式孕兔肺組織MPO比較：采取不同液體復(fù)蘇方案后肺組織MPO表達水平不同，復(fù)蘇期末肺組織中MPO水平在各組間自高到低排列為NS組(3.05±0.34U/L)、NH組(2.47±0.23U/L)、HHH組(1.86±0.25U/L)。 2.不同復(fù)蘇方式孕兔血漿PAF比較

12、：失血性休克引起血清PAF升高， 3.病理改變：快速輸液復(fù)蘇組(NS組)較較限制性輸液復(fù)蘇組(NH、HHH組)II肺泡細胞表面微絨毛減少、變短或消失，板層體少且空化，線粒體腫脹、嵴減少，排列紊亂。 [結(jié)論]： 限制性輸液下調(diào)了休克后血清PAF的水平，減輕了肺組織中性粒細胞扣押和聚集的程度，有利于緩解局部缺血缺氧區(qū)組織細胞的損害。 第三章：不同限制性輸液方案對孕兔非控制性失血性休克各器官ATP酶活性的影響[

13、目的]休克后缺血缺氧的細胞發(fā)生多通路的變化，細胞能量代謝從有氧代謝轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧糖酵解，引起細胞內(nèi)乳酸、氫離子和無機磷酸鹽的堆積。 [方法]： l、實驗分組和方法同第三章。 2、監(jiān)測指標：于實驗0min、30min、90min、180min抽血檢測LA、Na+、K+水平，實驗結(jié)束后處死動物取心臟、肝臟、肺臟、腎臟、小腸和骨骼肌等組織檢測Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。Na+、K+采用全自動電

14、解質(zhì)監(jiān)測儀(美國康寧公司)監(jiān)測；LA、ATP酶試劑盒購自南京建成生物工程公司。 [結(jié)果]： 1、不同復(fù)蘇方式孕兔各組織ATP酶活性水平比較：失血性休克引起Na+-K+-ATP酶、Ca2+.Mg2+-ATP酶活性的升高， 2、不同復(fù)蘇方式孕兔血漿乳酸、血鈉、血鉀水平比較： [結(jié)論]： 孕兔非控制性失血性休克導(dǎo)致能量代謝障礙，不同器官影響不同，其中心肌和骨胳肌較肺、腸組織中ATP酶活性改變顯著。

15、 第四章：不同限制性輸液方案對孕兔非控制性失血性休克各器官缺血再灌注損傷的影響 [目的]： 本研究應(yīng)用孕兔非控制性失血性休克模型研究不同的液體復(fù)蘇方案對孕兔失血性休克時各臟器SOD、MDA水平的影響，分析不同復(fù)蘇方法對組織缺血再灌注的影響，探討不同復(fù)蘇方法對休克后續(xù)治療的意義。 [方法]： 1、實驗分組和方法同第三章。 2、監(jiān)測指標：實驗結(jié)束后處死動物取心臟、肝臟、肺臟、腎臟、小腸和骨骼肌等組織

16、檢測SOD活性和MDA水平。SOD、MDA試劑盒購自南京建成生物工程公司。 [結(jié)果]： 1、失血性休克后各器官超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平的變化： 2、不同復(fù)蘇方式孕兔各組織SOD活性及MDA水平比較：其中肺、肝、腎、腸組織中組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義， [結(jié)論]： 對非控制性出血性休克模型院前期限制性輸液復(fù)蘇緩解了組織缺血再灌注損傷，高張高膠限制性輸液效果更明顯。 全

17、文小結(jié)： 1、限制性輸液復(fù)蘇較快速輸液復(fù)蘇微動脈收縮減輕，F(xiàn)CD數(shù)目增多，組織灌流增加，動物生存時間延長，生存率提高。高張高膠限制性輸液較等滲晶體限制性輸液復(fù)蘇孕兔失血性休克能較明顯的改善微循環(huán)、減少輸液量，可望應(yīng)用于院前急救。 2、限制性輸液下調(diào)了休克后血清PAF水平，降低了肺組織中性粒細胞扣押和聚集的程度，緩解了由中性粒細胞激活誘發(fā)的免疫反應(yīng)， 3、孕兔非控制性失血性休克后導(dǎo)致能量代謝障礙，不同器官影響不同，