抗牛支原體及巴氏桿菌性肺炎二聯(lián)卵黃抗體的制備及應(yīng)用效果研究.pdf

1、由牛支原體和多殺性巴氏桿菌混合感染引起的犢牛肺炎和關(guān)節(jié)炎,可導(dǎo)致大量犢牛的死亡及嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因國(guó)內(nèi)尚無(wú)理想的疫苗對(duì)其進(jìn)行有效的預(yù)防,抗菌藥物易產(chǎn)生耐藥性及效果不穩(wěn)定。本研究旨在制備抗牛支原體及多殺性巴氏桿菌的卵黃抗體并進(jìn)行臨床應(yīng)用觀察,為本病提供新的防治方法。研究結(jié)果如下:
　　1、抗牛支原體高免卵黃抗體的制備:首免采用弗氏完全佐劑滅活苗免疫蛋雞,劑量為0.5mg/只,首免后第15、30、45d采用弗氏不完全佐劑滅活苗進(jìn)行加強(qiáng)

2、免疫,劑量分別為1mg/只、1.5mg/只、2mg/只。通過(guò)間接ELISA的方法檢測(cè)卵黃抗體效價(jià),結(jié)果表明:在首免后第15d卵黃抗體效價(jià)不斷增高,免疫后第60d達(dá)到高峰,效價(jià)為1:128000,并維持30d以上效價(jià)開始下降。
　　2、抗牛多殺性巴氏桿菌高免卵黃抗體的制備:首免采用弗氏完全佐劑滅活苗免疫蛋雞,劑量為15億/只,首免后第10、20、30d采用弗氏不完全佐劑滅活苗加強(qiáng)免疫,劑量為30億/只。采用已建立的IHA方法檢測(cè)卵黃

3、抗體效價(jià),結(jié)果表明:在首免后第3周出現(xiàn)抗體并且效價(jià)不斷增高,免疫后第7周抗體效價(jià)達(dá)到高峰,效價(jià)為1:1024,持續(xù)5周開始下降。
　　3、抗牛支原體及多殺性巴氏桿菌二聯(lián)IgY的制備:通過(guò)對(duì)水稀釋法、氯仿法和卡拉膠法三種提取IgY方法的比較,結(jié)果表明:采用卡拉膠結(jié)合硫酸銨沉淀法提取卵黃抗體IgY,操作簡(jiǎn)便、時(shí)間短、IgY得率較高,可作為卵黃抗體IgY的首選提取方法;無(wú)菌檢測(cè)及動(dòng)物安全性實(shí)驗(yàn)表明制備的IgY安全可靠。
　　4、高