基質(zhì)金屬蛋白酶-9和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶在功能失調(diào)性子宮出血發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、目的： 本文通過檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase，MMP-9)及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)mRNA在無排卵型功能失調(diào)性子宮出血(簡(jiǎn)稱無排卵型功血)患者子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)情況，來進(jìn)一步證實(shí)iNOS和MMP-9(又明膠酶B，GelatinaseB)作為子宮內(nèi)膜局部調(diào)控因子在功血中的作用，以及子宮微環(huán)境的改變與無排卵型功血發(fā)病

2、機(jī)制的關(guān)系，從而為功能失調(diào)性子宮出血(簡(jiǎn)稱功血)的非激素治療提供一些新的思路和途徑。 方法： 一、標(biāo)本的采集分組 自2005年10月至2006年3月，于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科門診因不規(guī)則陰道流血就診并行刮宮的患者中采集無排卵型功血者的子宮內(nèi)膜60例作為實(shí)驗(yàn)組，平均年齡(39.21±3.71)歲，按世界衛(wèi)生組織(WHO，Scully RE等建議1994年)制定的標(biāo)準(zhǔn)分型，30例為單純性增生子宮內(nèi)膜，另30例為

3、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜；對(duì)照組20例，為正常增生期的子宮內(nèi)膜標(biāo)本，取自同期在我科行子宮切除術(shù)的月經(jīng)周期正常的子宮肌瘤患者，平均年齡(42.47±2.08)歲。兩組研究對(duì)象要求3個(gè)月內(nèi)未用過激素類藥物，一年內(nèi)未放置宮內(nèi)節(jié)育環(huán)。取材：于刮宮(或子宮離體)后5分鐘內(nèi)迅速取子宮內(nèi)膜組織，立即置入液氮中冷凍，4小時(shí)后再轉(zhuǎn)入．70℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?二、實(shí)驗(yàn)方法 應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)iNOS及MMP-9mRNA在子宮內(nèi)膜中的表達(dá)。

4、步驟包括： 1、采用RNAout試劑說明書所提供的方法進(jìn)行總RNA的提取。 2、按RT-PCR試劑盒說明配制反應(yīng)體系后進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(RT)及聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)。 3、mRNA表達(dá)的半定量分析三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，并采用SPSS13.0軟件進(jìn)行成組設(shè)計(jì)兩個(gè)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。 結(jié)果： 1、正常增生期子宮內(nèi)膜組織中iNOS和MMP-9mRNA均表達(dá)。 2、無排卵型功血患者的子

5、宮內(nèi)膜組織中iNOS mRNA表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，兩者之間的差異有顯著性意義(P<0.01)。 3、復(fù)雜增生組的子宮內(nèi)膜iNOS mRNA的表達(dá)水平高于單純?cè)錾M，二者之間的差異具有顯著性意義(P<0.01)。 4、無排卵型功血患者的子宮內(nèi)膜組織中MMP-9mRNA表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，兩者之間的差異有顯著性意義(P<0.01)。 5、復(fù)雜增生組的子宮內(nèi)膜MMP-9mRNA的表達(dá)水平高于單純?cè)錾M，二者之間