血紅蛋白誘導(dǎo)一氧化氮合酶過(guò)表達(dá)與一氧化氮生成在大鼠腦出血后血腦屏障破壞中的作用與意義.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2010級(jí)碩士學(xué)位論文血紅蛋白誘導(dǎo)一氧化氮合酶過(guò)表達(dá)與一氧化氮生成在大鼠腦出血后血腦屏障破壞中的作用與意義HemoglobinInducedNitricOxideSynthaseOverexpressionandNitricOxideProductionContributetoBloodBrainBarrierDisruptionintheRat課題來(lái)源：國(guó)家自然科學(xué)基金(81271314)廣東省教育部產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項(xiàng)目(201

2、28091100154)學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)培養(yǎng)類(lèi)型培養(yǎng)層次所在學(xué)院楊碩陳祚招副教授外科學(xué)(神經(jīng)外科)學(xué)術(shù)型碩士南方醫(yī)科大學(xué)第It盎床學(xué)院答辯委員會(huì)主席陸永建教授答辯委員會(huì)成員全偉教授牟永告教授李方成教授方陸雄教授論文評(píng)閱人牟永告教授汪求精教授2013年4月1O日廣州摘要放和蓄積，且釋放的血紅蛋白可能是導(dǎo)致血腦屏障損傷的重要病理介質(zhì)之一。一氧化氮(Nitricoxide，NO)是體內(nèi)一種重要的調(diào)節(jié)分子，是由一氧化氮合酶(nitri

3、coxidesynthase，NOS)以精氨酸為底物合成的。NOS有三種形式，分別為誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(inducibleNOS，iNOS)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialNOS，eNOS)和神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronalNOS，nNOS)。生理狀態(tài)下，NO在脈管系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮著許多重要作用，包括神經(jīng)傳遞的調(diào)節(jié)、局部血流調(diào)節(jié)和參與免疫反應(yīng)。然而，由NOS合成釋放的過(guò)量的NO會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的神經(jīng)毒性作用。在急性高

4、血壓、感染、細(xì)菌性腦膜炎和腦缺血中，過(guò)量生成的NO會(huì)導(dǎo)致BBB結(jié)構(gòu)和功能的破壞。此外，除了NO自身的毒性作用，它的衍生物特別是過(guò)氧硝酸鹽可產(chǎn)生更嚴(yán)重的損傷作用，包括細(xì)胞損傷，興奮性毒性和BBB破壞。目的：本研究通過(guò)向大鼠右側(cè)尾狀核內(nèi)注入Hb，檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)周?chē)X組織血腦屏障通透性、緊密連接蛋白claudin5、occludin、ZO1、JAM1mRNA的表達(dá)變化、鐵離子蓄積情況、NOS和NO表達(dá)生成變化，探究Hb對(duì)血腦屏障結(jié)構(gòu)和功能的影

5、響，并進(jìn)一步分析NOS和NO在此過(guò)程中的作用。實(shí)驗(yàn)方法：1、實(shí)驗(yàn)分組及模型制作SPF級(jí)SD成年雄性大鼠230只，體質(zhì)量為250一3009，隨機(jī)分為正常組、Hb組和假手術(shù)組，后兩組按照模型完成后觀察時(shí)間分為6h、12h、24h、48h、3d和7d共6個(gè)亞組。立體定向穿刺大鼠右側(cè)尾狀核，注射20lal血紅蛋白溶液(150g／L)，制作Hb大鼠腦內(nèi)注入模型。假手術(shù)組大鼠在相同位置僅作單純穿刺。2、腦組織石蠟切片制作及HE染色大鼠麻醉后，依次使