小腸移植大鼠一氧化氮、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶及低氧誘導(dǎo)因子1α表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究目的 1.熟練掌握大鼠異位節(jié)段性小腸移植動(dòng)物模型的建立方法.2.研究大鼠小腸移植術(shù)后血清中NO的濃度變化及其與急性排斥反應(yīng)的關(guān)系.3.研究大鼠小腸移植術(shù)后小腸組織中NOS、iNOS的活性變化,HIF-1α的表達(dá),探討HIF-1α對(duì)小腸移植的影響及相關(guān)作用.研究方法 實(shí)驗(yàn)分組:A組(對(duì)照組):正常SD大鼠;B組(熱缺血組):建立大鼠熱缺血再灌注模型,夾閉腸系膜上動(dòng)脈1小時(shí)后再灌注分為0小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)、6小時(shí)各亞組;C組(冷缺血組

2、):SD大鼠,冷缺血2.5小時(shí);D組(同系移植組):建立大鼠異位節(jié)段性小腸移植模型(冷缺血2.5小時(shí)),術(shù)后常規(guī)補(bǔ)液,給予抗生素;E組(同種移植組):建立大鼠異位節(jié)段性小腸移植模型(冷缺血2.5小時(shí)),術(shù)后常規(guī)補(bǔ)液,給予抗生素,同D組;F組:建立大鼠異位節(jié)段性小腸移植模型(冷缺血2.5小時(shí)),行同種移植,術(shù)后常規(guī)補(bǔ)液,給予抗生素,并肌注環(huán)孢菌素A.D、E、F組分別于術(shù)后第3、5、7天取材,其余各組按各時(shí)點(diǎn)取材.小腸標(biāo)本HE病理染色,觀察

3、組織學(xué)變化;用硝酸還原酶法檢測(cè)血清中NO濃度;用分光光度法測(cè)定移植小腸組織中NOS、iNOS的活性變化;用免疫組織化學(xué)的方法觀察小腸組織中HIF-1α的表達(dá).結(jié)論 1.血清NO在大鼠小腸缺血再灌注中的水平變化,提示NO在小腸移植過程中起重要作用.2.大鼠小腸同種移植后小腸組織中NOS及iNOS的活性和血清NO水平明顯增高,但不與急性排斥反應(yīng)的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)的關(guān)系.血清NO水平的檢測(cè)對(duì)于小腸移植急性排斥反應(yīng)的發(fā)生可能具有早期的輔助診斷意