庫普弗細(xì)胞的細(xì)胞生長、分化、發(fā)育相關(guān)基因與大鼠肝再生的相關(guān)性研究.pdf

1、庫普弗細(xì)胞屬肝臟特異的巨噬細(xì)胞，具有多種重要功能，然而其在大鼠肝再生中發(fā)揮何種作用，報(bào)道較少。肝再生進(jìn)程涉及細(xì)胞分化、去分化和組織結(jié)構(gòu)重建等生理生化過程，為在基因轉(zhuǎn)錄水平了解庫普弗細(xì)胞生長、分化和發(fā)育相關(guān)基因與大鼠肝再生的相關(guān)性，本研究按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(PH)模型，用兩步灌流法分散肝臟細(xì)胞，用Percoll密度梯度離心和免疫磁珠分離相結(jié)合方法分離庫普弗細(xì)胞，用免疫細(xì)胞化學(xué)對(duì)其進(jìn)行鑒定，用查閱網(wǎng)站資料和相關(guān)論文等

2、方法獲得了上述基因，并用RatGenome2302.0芯片檢測了它們在大鼠再生肝庫普弗細(xì)胞中0、2、6、12、24、30、36、72、120、168等十個(gè)時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情況，初步證實(shí)57個(gè)庫普弗細(xì)胞生長相關(guān)基因和39個(gè)庫普弗細(xì)胞分化和發(fā)育相關(guān)基因參與肝再生。 57個(gè)庫普弗細(xì)胞生長相關(guān)基因起始表達(dá)上調(diào)和下調(diào)的基因數(shù)分別為40和17個(gè)，基因的總上調(diào)和下調(diào)次數(shù)為141和57：在肝再生啟動(dòng)期(PH后2-6h)、進(jìn)展期(PH后6-72h)和

3、終止期(PH后72-168h)等三個(gè)階段起始上調(diào)和下調(diào)的基因數(shù)分別為28和9，9和8，3和0；基因上調(diào)和下調(diào)的總表達(dá)次數(shù)分別為35和11，68和36，38和10，表明庫普弗細(xì)胞生長相關(guān)基因主要在肝再生啟動(dòng)階段起始表達(dá)，在不同階段發(fā)揮作用。庫普弗細(xì)胞生長、生長正調(diào)控和生長負(fù)調(diào)控相關(guān)基因分別為35、5和17個(gè)，它們的表達(dá)模式分別為10、5和9種。39個(gè)庫普弗細(xì)胞分化和發(fā)育相關(guān)基因起始表達(dá)上調(diào)和下調(diào)的基因數(shù)分別為20和19個(gè)，總上調(diào)和下調(diào)次數(shù)

4、分別為55和61；在肝再生啟動(dòng)、進(jìn)展和終止期起始上調(diào)和下調(diào)的基因數(shù)為10和7個(gè)，7和10個(gè)，3和2個(gè)，上調(diào)和下調(diào)的總次數(shù)分別為15和8，27和39，13和14次，表明庫普弗細(xì)胞分化相和發(fā)育關(guān)基因主要在肝再生啟動(dòng)和進(jìn)展期起始表達(dá)。根據(jù)它們在再生肝庫普弗細(xì)胞中表達(dá)情況將其表達(dá)模式分為13種。 根據(jù)上述結(jié)果推測57個(gè)庫普弗細(xì)胞生長相關(guān)基因和39個(gè)庫普弗細(xì)胞分化、發(fā)育相關(guān)基因與大鼠肝再生密切相關(guān)，它們通過調(diào)控庫普弗細(xì)胞生長、分化、發(fā)育參