復(fù)方良附顆粒含藥血清誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞凋亡研究.pdf

1、胃癌(gastric cancer)是最常見的惡性腫瘤之一，目前世界范圍內(nèi)胃癌的發(fā)病率有所下降，但我國仍為胃癌的高發(fā)地區(qū)。手術(shù)切除是治療胃癌的首選方法，但由于臨床缺乏特異性癥狀和體征，早期診斷率較低，手術(shù)對進(jìn)展期胃癌的治療效果并不理想，根治手術(shù)后有50％患者5年內(nèi)出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)和/或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，常見的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移部位是切除部位、肝臟和腹膜表面。因此，除手術(shù)和放療外，化療仍是胃癌治療的主要手段，但嚴(yán)重不良反應(yīng)使患者難以耐受，中醫(yī)藥的應(yīng)用越來越受

2、到重視。 現(xiàn)階段中醫(yī)防治腫瘤工作已有很大進(jìn)展，不僅表現(xiàn)在臨床療效的提高，診治手段的多樣化，還體現(xiàn)在理論實(shí)驗(yàn)研究的深入，從而挖掘了中醫(yī)藥所蘊(yùn)藏的科學(xué)內(nèi)涵，用現(xiàn)代理論闡明了中醫(yī)藥治療機(jī)理，使中醫(yī)藥抗癌步入了一個新的階段。 1.目的: 以人胃癌細(xì)胞BGC-823為靶細(xì)胞，以新加良附顆粒為受試藥物，通過體外細(xì)胞孵育觀察不同濃度含藥血清對人胃癌細(xì)胞BGC-823的抑制作用，以形態(tài)學(xué)觀察及流式細(xì)胞儀檢測來評定凋亡，以West

3、ern blot測含藥血清干預(yù)后BGC-823細(xì)胞的Bcl-2和Akt的蛋白表達(dá)，探討新加良附顆粒抗腫瘤的機(jī)理。 2.方法: 以新加良附顆粒飼養(yǎng)大鼠7天后獲得含藥血清，用MTT法觀察作用48h，72h，96h后不同濃度的含藥血清對人胃癌細(xì)胞BGC-823細(xì)胞增殖的抑制作用。用倒置顯微鏡和電子顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)及流式細(xì)胞儀檢測對人胃癌細(xì)胞BGC-823細(xì)胞凋亡作用。應(yīng)用免疫蛋白印記方法研究含藥血清對Bcl-2和Akt表達(dá)

4、的影響。 3.結(jié)果: 不同濃度含藥血清可抑制BGC-823細(xì)胞生長和增殖，具有劑量依賴性。A值分別為0.52±0.08、0.44±0.06，與對照組相比P<0.05。抑制率為40.35±6.45、30.29±4.89，與CTX組相比P>0.05。出現(xiàn)凋亡典型的超微結(jié)構(gòu)改變?nèi)绾怂槠?。流式?xì)胞檢測結(jié)果表明新加良附顆粒有誘導(dǎo)：BGC-823細(xì)胞凋亡作用，隨劑量的增加，細(xì)胞凋亡增加，凋亡率35.92±0.87、29.51±1.0