反義微小miR-29b對(duì)體外膀胱癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用.pdf

1、目的：觀察微小microRNA-29b（miR-29b）反義寡核苷酸（ASODN）對(duì)體外人膀胱癌細(xì)胞株BIU87細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，探討反義微小miR-29b（AS-miR-29b）對(duì)膀胱癌BIU87細(xì)胞發(fā)生發(fā)展的可能機(jī)制。
　　方法：應(yīng)用質(zhì)粒介導(dǎo)的反義寡核苷酸（AS-miR-29b）轉(zhuǎn)染人膀胱癌細(xì)胞株BIU87細(xì)胞。確定能夠轉(zhuǎn)染成功后，轉(zhuǎn)染后的膀胱癌細(xì)胞miRNA-29b相對(duì)表達(dá)量應(yīng)用熒光定量PCR法檢測(cè)。然后分別通過(guò)MTT比色法、

2、transwell、流式細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)AS-miR-29b對(duì)BUI87細(xì)胞的增殖、侵襲能力、凋亡的影響，AS-miR-29b轉(zhuǎn)染組與轉(zhuǎn)染無(wú)義序列組和空白對(duì)照組相對(duì)比。
　　結(jié)果：1.質(zhì)粒介導(dǎo)的反義寡核苷酸（AS-miR-29b）可在膀胱癌BIU87細(xì)胞中成功表達(dá)，通過(guò)流式檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，其中1:3組轉(zhuǎn)染效率最高，達(dá)到55.7％。2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，結(jié)果AS-miR-29b的表達(dá)在轉(zhuǎn)染組與陰性對(duì)照組及空白對(duì)照組相比，表達(dá)

3、明顯上調(diào)，差異有顯著性（P<0.05）。3. MTT實(shí)驗(yàn)細(xì)胞計(jì)數(shù)后，結(jié)果表明轉(zhuǎn)染 AS-miR-29b組與其他兩組相比，BIU87細(xì)胞生長(zhǎng)速度減慢，細(xì)胞增殖受限，有顯著差異性（P<0.05）。4. Transwell行侵襲實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)染AS-miR-29b組與轉(zhuǎn)染無(wú)義序列組和空白對(duì)照組相比，穿過(guò)基質(zhì)膠的細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯減少，侵襲能力減弱，差異有顯著性（P<0.05）。5.流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)凋亡及壞死，BIU87細(xì)胞的凋亡和壞死比例在轉(zhuǎn)染 AS-mi