休克腸淋巴對大鼠紅細(xì)胞流變行為的作用與機(jī)制.pdf

1、背景：休克發(fā)病學(xué)過程中的血液流變學(xué)事件，成為休克臨床救治的關(guān)鍵靶點(diǎn)，也是危重病醫(yī)學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。腸淋巴途徑在休克發(fā)病學(xué)中具有重要作用，紅細(xì)胞流變行為是影響血液流變性、微循環(huán)的關(guān)鍵因素，休克腸淋巴液回流與紅細(xì)胞流變行為的關(guān)系如何?值得研究。
　　 目的：本研究以腸淋巴液引流為手段，并將引流的休克腸淋巴液輸入正常大鼠，觀察腸淋巴液對失血性休克大鼠紅細(xì)胞電泳能力、紅細(xì)胞變形性、紅細(xì)胞體積參數(shù)、紅細(xì)胞沉降等紅細(xì)胞流變性指標(biāo)以及血液黏度

2、的作用；同時制備紅細(xì)胞膜懸液，觀察休克腸淋巴液對紅細(xì)胞膜自由基指標(biāo)的影響，探討休克腸淋巴液影響紅細(xì)胞流變行為的作用機(jī)制。從紅細(xì)胞流變特性的角度，探討腸淋巴途徑在休克發(fā)展惡化中的作用，為重癥休克的防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)與理論參考。
　　 方法：Wistar雄性大鼠24只，隨機(jī)均分為假休克組、休克組、休克腸淋巴液引流組（引流組）、休克腸淋巴液回輸組（回輸組）。所有大鼠經(jīng)戊巴比妥鈉肌肉注射麻醉后，行股部手術(shù)，右股靜脈注射肝素鈉全身抗凝，右股

3、動脈插管連接生物信號采集系統(tǒng)，連續(xù)監(jiān)測平均動脈血壓(mean artery pressure， MAP)；左側(cè)股動脈插管后連接注射器固定于抽注機(jī)上備放血用。然后行腹部手術(shù)，剝離腸系膜淋巴管。待所有手術(shù)完成、穩(wěn)定30min后，休克組與引流組大鼠經(jīng)左股動脈勻速放血，10min內(nèi)將MAP降至40mmHg，復(fù)制失血性休克模型。假休克組、回輸組大鼠均進(jìn)行相同的手術(shù)操作，但不放血。記錄MAP。引流組大鼠維持低血壓1h后，行腸系膜淋巴管插管，引流休克

4、腸淋巴液至休克3h;將引流的休克腸淋巴液離心去細(xì)胞后的淋漿以等量生理鹽水稀釋后，回輸至己完成手術(shù)的回輸組大鼠(2ml/kg)，時間為30min。休克組維持低血壓3h、引流組引流休克2～3h腸淋巴液后、假休克組與回輸組在相應(yīng)時間點(diǎn)，經(jīng)腹主動脈取血，根據(jù)檢測指標(biāo)不同分別處理。EDTA-K2抗凝的全血標(biāo)本，檢測紅細(xì)胞參數(shù)，如：紅細(xì)胞壓積（hematocrit，HCT）、平均紅細(xì)胞體積(mean corpuscular volume， MCV)

5、、紅細(xì)胞體積分布寬度(red blood cell volume distribution width, RDW）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin， MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(mean corpuscular hemoglubin concentration， MCHC)等；肝素抗凝全血標(biāo)本，檢測血液黏度、紅細(xì)胞電泳能力、紅細(xì)胞沉降率(erythrocyte sedimentati

6、on rate， ESR)、紅細(xì)胞變形性與聚集性等指標(biāo)；同時制備紅細(xì)胞膜懸液，應(yīng)用黃嘌呤氧化酶法、改良硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)微量法分別檢測紅細(xì)胞膜超氧化物歧化酶(superoxide dismutase， SOD)、丙二醛(malondialdehyde， MDA)等自由基指標(biāo)。
　　 結(jié)果：①休克腸淋巴液對大鼠紅細(xì)胞流變性的影響：休克組大鼠紅細(xì)胞變形指數(shù)顯著低于、紅細(xì)胞聚集性指數(shù)顯著高

7、于假休克組，引流組、回輸組紅細(xì)胞變形指數(shù)顯著高于休克組，引流組紅細(xì)胞聚集性指數(shù)顯著低于休克組、回輸組紅細(xì)胞聚集性指數(shù)顯著高于引流組；休克組ESR、血沉方程K值均顯著高于假休克組，引流組與回輸組大鼠ESR、血沉方程K值均顯著低于休克組；休克組、回輸組紅細(xì)胞群體電泳時間顯著長于休克組、引流組和回輸組；紅細(xì)胞群體電泳率與群體遷移率顯著低于假休克組，且回輸組紅細(xì)胞群體電泳時間顯著長于引流組、紅細(xì)胞群體電泳率與群體遷移率均顯著低于引流組；其它各項(xiàng)

8、指標(biāo)未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。②休克腸淋巴液對大鼠血液黏度的影響：休克組、引流組大鼠在各切率下的全血黏度均顯著低于假休克組，且引流組在各切率下的全血黏度均顯著高于休克組，回輸組在各切率下的全血黏度均高于休克組與引流組；休克組血漿黏度顯著高于假休克組，引流組血漿黏度仍低于休克組；休克組全血低切與高切相對黏度均顯著低于假休克組，引流組與回輸組的兩個指標(biāo)均高于休克組；休克組、引流組的全血低切與高切還原黏度均顯著低于假休克組，回輸組的兩個指標(biāo)均顯著高于假

9、休克組、休克組、引流組。③休克腸淋巴液對大鼠紅細(xì)胞參數(shù)的影響：休克組RBC、HCT、Hb、MCHC、引流組MCHC、回輸組大鼠RBC、HCT、Hb顯著低于假休克組，休克組MCV、引流組RDW-SD、回輸組MCV顯著高于假休克組；引流組HCT、RDW-SD顯著高于休克組，回輸組HCT低于、MCH與MCHC高于引流組；其它指標(biāo)未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。④休克腸淋巴液對大鼠紅細(xì)胞膜自由基損傷指標(biāo)的影響：休克組、引流組與回輸組紅細(xì)胞膜MDA含量均顯著高于

10、假休克組，休克組紅細(xì)胞膜SOD活性顯著低于假休克組；引流組紅細(xì)胞膜MDA含量顯著低于、SOD活性顯著高于休克組；回輸組紅細(xì)胞膜MDA含量顯著低于休克組、SOD活性顯著低于引流組。
　　 結(jié)論：研究結(jié)果表明，休克引起了大鼠紅細(xì)胞電泳能力、變形能力降低，ESR、紅細(xì)胞聚集性升高，其機(jī)制與休克后自由基損傷、炎癥與毒素的損傷有關(guān)；休克腸淋巴液引流減少了毒性物質(zhì)回流，降低紅細(xì)胞膜MDA水平、改善紅細(xì)胞形態(tài)，從而提升了紅細(xì)胞的流變能力；休克

11、腸淋巴液回輸至正常大鼠，則顯著降低了紅細(xì)胞的流變行為，進(jìn)一步證明了休克腸淋巴液對紅細(xì)胞的損傷作用。休克引起了大鼠RBC、HCT、Hb、MCHC等參數(shù)的降低，MCV顯著升高，從而導(dǎo)致全血黏度降低，其機(jī)制與休克后機(jī)體自身輸液及紅細(xì)胞膜損傷、通透性增高等因素有關(guān)；休克腸淋巴液引流則提高了HCT，從而將已降低的全血黏度提高至正常水平，其機(jī)制與減少毒性物質(zhì)回流降低機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)；回輸休克腸淋巴液至正常大鼠又降低了RBC、HCT、Hb水平，從而引