休克腸淋巴液對小鼠腎組織HMGB1、RAGE表達的作用.pdf

1、目的：過度炎癥反應是重癥失血性休克引起急性腎損傷的發(fā)生機制之一；失血性休克狀態(tài)下的腸損傷導致的毒性物質通過腸淋巴液回流至全身，是引起器官損傷的一個主要機制；腸淋巴液引流減輕失血性休克動物腎組織損傷與功能障礙的相關機制，還需要進一步研究。本文目的在于觀察腸淋巴液引流對失血性休克小鼠腎組織高遷移率族蛋白1（ high mobility group box-1 protein，HMGB1）、晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（receptor for a

2、dvanced glycation end products，RAGE）mRNA表達與蛋白含量以及Nod樣受體家族（Nod-like receptor family, pyrin domain containing，NLRP）3炎癥小體（inflammasome）mRNA表達的影響；進一步將引流至體外的休克腸淋巴液（post hemorrhagic shock mesenteric lymph，PHSML）靜脈輸入正常小鼠，觀察對腎組織

3、HMGB1與RAGE含量的影響，探討腸淋巴途徑在失血性休克腎損傷發(fā)病學中的作用。
　　方法：18只野生型C57BL/6J小鼠隨機均分為：假手術組、休克組、休克+引流組。休克組、休克+引流組小鼠按我室常規(guī)方法復制失血性休克模型，維持低血壓40±2 mmHg90 min后，經(jīng)股動脈行液體復蘇（放出的全血加等量林格氏液），30min完成；觀察至輸液結束后3h。輸液結束后，按常規(guī)方法引流休克+引流組小鼠的PHSML至3h。假手術組接受相同

4、的手術，但不放血、不輸液。各組小鼠在輸液結束后3h或相當時間點，留取固定位置的腎組織；部分組織用于提取RNA，應用qRT-PCR方法檢測HMGB1、RAGE、NLRP3 mRNA表達；部分組織用于制備組織勻漿，應用ELISA方法檢測HMGB1、RAGE含量。取6只健康、雄性C57BL/6J小鼠，常規(guī)方法麻醉后，引流正常腸淋巴液（normal mesenteric lymph， NML），持續(xù)1h；將 NML、PHSML分別輸入正常小鼠以

5、及經(jīng) HMGB1抑制劑甘草酸（glycyrrhizin，GL）預處理的小鼠，均 n=6；3h后留取腎組織，檢測腎組織HMGB1、RAGE含量。
　　結果：休克組小鼠腎組織 HMGB1、RAGE、NLRP3 mRNA表達及HMGB1、RAGE含量均顯著高于假手術組（P<0.05）；休克+引流組小鼠腎組織HMGB1、RAGE、NLRP3 mRNA表達及HMGB1、RAGE含量均顯著低于休克組（ P<0.05）。PHSML靜脈輸入增加了

6、正常小鼠腎組織RAGE含量（P<0.05），但對HMGB1含量無明顯作用（P>0.05）；GL預處理顯著降低了小鼠腎組織HMGB1、RAGE含量（P<0.05）。
　　結論：失血性休克提高了小鼠腎組織HMGB1、RAGE mRNA表達及含量，從而導致NLRP3炎性小體表達增高，這一因素參與了失血性休克引起的腎損傷；腸淋巴液引流降低了失血性休克小鼠腎組織 HMGB1、RAGE mRNA表達與含量水平，PHSML增高了正常小鼠腎組織R