高脂喂養(yǎng)對(duì)子代大鼠營(yíng)養(yǎng)代謝及GHS-R、GLP-1R基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 肥胖和胰島素抵抗是代謝綜合征(MS)的中心環(huán)節(jié),是多種代謝性相關(guān)疾病的危險(xiǎn)因素。肥胖易感人群多存在營(yíng)養(yǎng)代謝模式異常,而這種不良代謝模式可能形成于胎兒期。母體過(guò)量的營(yíng)養(yǎng)攝入(如高脂飲食)可能造成子代代謝遺傳缺陷。機(jī)體維持能量代謝動(dòng)態(tài)平衡主要依靠胃腸信號(hào)——神經(jīng)中樞轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,胃腸激素為其信使分子。與肥胖及胰島素分泌相關(guān)的胃腸激素主要包括饑餓素(Ghrelin)和胰高血糖素樣肽(GLP-1)等,其作用受體分別為促生長(zhǎng)激素

2、受體(GHS-R)和胰高血糖素樣肽受體(GLP-1R)。近年來(lái),對(duì)胃腸激素的研究表明其在攝食行為及能量代謝方面發(fā)揮重要作用,因其與肥胖和胰島素抵抗發(fā)生密切相關(guān)而倍受關(guān)注。本研究采用高脂喂養(yǎng)妊娠期及哺乳期大鼠,旨在觀察不同發(fā)育階段子代大鼠臟器中GHS-R及GL-1R mRNA表達(dá)水平的變化,探討其對(duì)子代大鼠營(yíng)養(yǎng)代謝的影響。
　　 材料與方法
　　 健康成熟Wistar雌性處女鼠32只(體重200±10g),健康成熟雄性Wi

3、star鼠8只(體重210±10g),適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)選擇雌雄大鼠按4:1比例合籠。雌鼠確認(rèn)懷孕后按受孕順序隨機(jī)分為普食(SD)對(duì)照組和高脂(HFD)組,分別投喂基礎(chǔ)飼料和高脂飼料,兩組飼料喂養(yǎng)從妊娠期至哺乳期結(jié)束(即產(chǎn)后21天)。
　　 仔鼠出生后按隨機(jī)原則每窩各留8只(雌、雄各4只),離乳后,高脂組子代大鼠隨機(jī)分為高脂組及普食組,分別投喂高脂飼料及基礎(chǔ)飼料。即分為:①親代高脂子代高脂(HFD/HFD)組-簡(jiǎn)稱(chēng)全高脂組;

4、②親代高脂子代普食(HFD/SD)組-簡(jiǎn)稱(chēng)僅親代高脂組;③親代普食子代普食(SD/SD)組-簡(jiǎn)稱(chēng)對(duì)照組,各組自由攝食飲水。
　　 于子代大鼠出生后每周稱(chēng)量體重,于2周末、4周末、8周末、12周末及16周末在3組中隨機(jī)選擇子代大鼠取材。禁食12小時(shí)(未斷乳前禁乳4小時(shí))后,麻醉下抽血,處死,留取胰腺及胃底組織。采用羅氏公司全活力型血糖儀檢測(cè)空腹血糖(Glucose),Architect ci8200全自動(dòng)生化免疫一體機(jī)(速濾法)測(cè)

5、定空腹血漿甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC),采用西門(mén)子Centaur immunoassay system(化學(xué)發(fā)光法)測(cè)定空腹血漿胰島素。用Real-Time PCR方法檢測(cè)16周齡子代大鼠胃底GHS-R和胰腺的GLP-1R mRNA相對(duì)表達(dá)水平。
　　 進(jìn)行計(jì)算并比較。所有數(shù)據(jù)均以x±s表示,應(yīng)用SPSS11.5軟件進(jìn)行方差分析,p值小于0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、仔鼠出生后隨周

6、齡增加,體重不斷增加,8周齡后增長(zhǎng)更加迅速,全高脂喂養(yǎng)組體重高于其他組,這種差異在雄性子代表現(xiàn)更加明顯。出生時(shí)及哺乳期(0至3周齡)HFD組體重均高于SD組(P＜0.05),哺乳期結(jié)束(4周齡)后,HFD/HFD組及HFD/SD組均高于SD/SD組(P＜0.05),HFD/HFD組與HFD/SD組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。8周齡后雄性子代HFD/HFD組明顯高于其他組(P＜0.05),而雌性子代從10周齡后方顯現(xiàn)。8周齡后HFD/S

7、D組與SD/SD組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 2、隨周齡增長(zhǎng),全高脂喂養(yǎng)組子代大鼠空腹血糖值逐漸高于對(duì)照組。2周齡時(shí)HFD/HFD組與對(duì)照組空腹血糖值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),4周齡時(shí)HFD/HFD組與HFD/SD組均高于SD/SD組(P＜0.05),但血糖值均在正常范圍內(nèi)。8周齡后HFD/HFD組空腹血糖超出正常值,高于HFD/SD組和SD/SD組(P＜0.05),增長(zhǎng)曲線(xiàn)明顯上揚(yáng)。8周齡后HFD/SD組與對(duì)照組

8、空腹血糖值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 3、子代大鼠空腹血漿胰島素水平隨周齡增長(zhǎng)而增高。2周齡時(shí)HFD/HFD組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),4周齡時(shí)HFD/HFD組與HFD/SD組胰島素水平高于SD/SD組(P＜0.05),8周齡后HFD/HFD組胰島素水平超出正常值范圍,且高于HFD/SD組和SD/SD組(P＜0.05)。HFD/SD組未超出正常值范圍,但高于SD/SD組(P＜0.05)。
　　 4、

9、各周齡子代大鼠各組TC水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),TG水平于12周齡后表現(xiàn)出差異,HFD/HFD組高于HFD/SD組和SD/SD組(P＜0.05),HFD/SD組與SD/SD組TG水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 5、子代大鼠16周齡時(shí),雄性HFD/HFD組胃底GHS-R mRNA表達(dá)水平明顯高于SD/SD組,P＜0.05,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;HFD/SD組胃底GHS-R mRNA表達(dá)水平明顯高于SD/SD組,P＜0

10、.05,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。雌性子代間胃底GHS-R mRNA表達(dá)水平各組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P＞0.05。雌性雄性HFD/HFD組胰腺GLP-1R mRNA表達(dá)水平均明顯低于SD/SD組,P＜0.05,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;HFD/SD組GLP-1RmRNA表達(dá)水平明顯低于SD/SD組,P＜0.05,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1、GHS-R與體重呈正相關(guān),GLP-1R與體重呈負(fù)相關(guān)。雄性子代大鼠體重可由GHS-R正向

11、調(diào)節(jié)和GLP-1R負(fù)向調(diào)節(jié),雌性大鼠體重主要由GLP-1R負(fù)向調(diào)節(jié)。
　　 2、妊娠期及哺乳期高脂喂養(yǎng)與子代大鼠的血糖水平呈正相關(guān),親代高脂可引起子代大鼠血糖升高。
　　 3、妊娠期及哺乳期高脂喂養(yǎng)與子代大鼠的血脂水平呈正相關(guān),主要表現(xiàn)在甘油三酯上,親代高脂可引起子代大鼠甘油三酯升高。
　　 4、妊娠期及哺乳期高脂喂養(yǎng)可使子代大鼠發(fā)生胰島素抵抗,8周齡時(shí)胰島素水平超出正常值上限,血糖辦較高,表現(xiàn)為高胰島素型糖尿病