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文檔簡介
1、目的:探討復合益生菌干預對肥胖小鼠及其子代脂代謝的影響。
方法:
1.將30只C57BL/6J雌性小鼠隨機分為對照組,肥胖組和菌群干預組,每組10只,分別給予正常飼料同時灌胃生理鹽水、高脂高糖飼料同時灌胃生理鹽水、高脂高糖飼料同時給予復合益生菌(雙歧桿菌、干酪乳桿菌、嗜熱鏈球菌及鼠李糖乳桿菌),單純喂養(yǎng)期6周,建立肥胖小鼠模型;將雌、雄鼠合籠受孕,懷孕期約3周,喂食飼料同上;母鼠哺乳期飲食同上,子鼠均母乳喂養(yǎng),3周后
2、處死母鼠及子鼠。
2.每周測量母鼠體重;留取母鼠哺乳期第21天糞便及血液標本,進行菌群及血脂分析;留存母鼠哺乳期第21天肝臟樣本進行HE染色分析。
3.測量子鼠出生后第3、7、14、21天體重;留取子鼠第21天糞便及血液樣本,進行菌群及血脂分析;留取子鼠第21天肝臟樣本進行HE染色分析。
4.糞便菌群分析:提取母鼠和子鼠的糞便菌群 DNA,PCR擴增后進行 DGGE電泳,關鍵條帶進行切膠回收后測序分析。
3、r> 5.血脂檢測:ELISA法檢測小鼠血清TC(總膽固醇)、TG(甘油三酯)、HDL(高密度脂蛋白)、LDL(低密度脂蛋白),計算TC/HDL、LDL/HDL比值。
結果:
1.復合益生菌干預對母鼠體重的影響
每周稱量母鼠體重繪制變化曲線,在整個飼養(yǎng)周期,飼喂高脂高糖飲食的肥胖組小鼠在各個時間點,體重明顯高于正常對照組;而菌群干預組母鼠在各時間點,體重均小于肥胖組,而更接近正常對照組。
2.復
4、合益生菌干預對母鼠腸道菌群的影響
聚類分析結果表明,對照組母鼠聚為一類,肥胖組母鼠聚為一類,可以看出肥胖母鼠的腸道菌群與正常母鼠存在明顯的差異;菌群干預組與對照組母鼠結果相互混雜,未形成明顯的聚類現(xiàn)象,可以看出復合益生菌干預后母鼠的腸道菌群組成與正常母鼠相似。
3.復合益生菌干預對母鼠血脂的影響
肥胖組母鼠與對照組對比,TC和LDL指標以及TC/HDL和LDL/HDL比值明顯升高,HDL明顯降低,TG沒有明
5、顯變化;菌群干預組母鼠TC、LDL、TC/HDL和LDL/HDL比肥胖組明顯降低,HDL明顯升高,TG沒有明顯變化;菌群干預組母鼠與對照組相比,TC、LDL、TC/HDL和LDL/HDL依然是明顯升高,TG和HDL沒有明顯變化。
4.復合益生菌干預對母鼠肝臟組織學的影響
經(jīng)過HE染色石蠟切片,顯微鏡下可見肥胖組母鼠肝臟發(fā)生脂肪變性,復合益生菌干預后脂肪變性有所緩解。
5.子鼠體重曲線
肥胖組子鼠在
6、各個檢測點體重明顯高于正常對照組子鼠;而菌群干預組子鼠在各個檢測點體重均小于肥胖組,而更接近正常對照組。
6.子鼠糞便菌群DGGE分析
聚類分析結果顯示,肥胖組子鼠聚為一類,對照組和菌群干預組子鼠聚為一大類,說明肥胖組與對照組子鼠的腸道菌群存在明顯的差異,而菌群干預組與對照組子鼠的腸道菌群沒有明顯差異。
7.子鼠血脂分析
肥胖組子鼠與對照組相比TC、HDL、LDL、TC/HDL和LDL/HDL明顯
7、升高,TG沒有明顯變化;菌群干預組子鼠與肥胖組相比,TC、HDL、LDL、TC/HDL和 LDL/HDL明顯降低;菌群干預組子鼠與對照組相比,各項結果均沒有明顯變化。
8.子鼠肝臟組織學變化
鏡下觀察發(fā)現(xiàn)肥胖組子鼠肝臟中呈現(xiàn)脂肪樣變性,菌群干預組子鼠的肝臟形態(tài)更接近對照組。
結論:
1.高脂高糖飲食誘導母鼠體重增加,腸道菌群紊亂,血脂代謝異常,肝臟發(fā)生脂肪樣變性。
2.高脂高糖飲食同時加
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