拉坦前列素游離酸對人Tenon囊成纖維細(xì)胞增殖和CTGF表達(dá)的影響.pdf

1、目的:長期使用抗青光眼藥物的患者行濾過手術(shù)后,濾過道瘢痕化的發(fā)生率可能高于無用藥史的患者。前列腺素類藥物是目前認(rèn)為最安全、最有效的局部抗青光眼藥物,臨床上應(yīng)用廣泛。本實(shí)驗(yàn)研究拉坦前列素的活性成分拉坦前列素游離酸(latanoprostfreeacid,Lat-FA)對Tenon囊成纖維細(xì)胞(humanTenonfibroblastcells,HTFs)HTFs增殖和分泌結(jié)締組織生長因子(connectivetissuegrowthfac

2、tor,CTGF)的影響,并對其調(diào)控機(jī)制進(jìn)行初步研究。
　　方法:遵照赫爾辛基宣言,征得病人同意后手術(shù)取眼科無青光眼病史的白內(nèi)障病人Tenon囊組織,原代培養(yǎng)Tenon囊成纖維細(xì)胞(HTFs),光學(xué)像差顯微鏡和吉姆薩(Giemsa)染色觀察細(xì)胞形態(tài)。
　　1.CCK-8試劑盒檢測不同時(shí)間不同濃度拉坦前列素游離酸(Lat-FA)作用于HTFs的OD值。
　　2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測Lat-FA對HTFs分泌

3、CTGF的影響。
　　3.應(yīng)用MAPK信號(hào)通路阻斷劑條件下,采用ELISA檢測Lat-FA對HTFs分泌CTGF的影響。
　　結(jié)果:1.不同濃度0ng/ml、0.5ng/ml、5ng/ml、50ng/ml、500ng/ml、5000ng/mlLat-FA作用于HTFs測得OD值分別為:0.334±0.011,0.336±0.010,0.338±0.009,0.359±0.011,0.389±0.018,0.424±0.021

4、,與對照組相比0.5ng/ml、5ng/ml組P值分別為0.665、0.375,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,其余三組統(tǒng)計(jì)學(xué)均有顯著性差異(P<0.05);不同時(shí)間段24h、48h、72hLat-FA作用于HTFs測得OD值分別為:0.349±0.030,0.361±0.032,0.379±0.039,24h與48小時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.088),72h組與其余兩組比較均存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　2.Lat-FA處理HTFs

5、24h后ELISA檢測不同組分泌CTGF:對照組為83.577±2.752ng/L,Lat-FA組為108.710±3.654ng/L;Lat-FA組與對照組相比,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　3.Lat-FA處理HTFs前,使用SP600125、SB203580、UO126三種MAPK信號(hào)通路亞家族阻斷劑,作用HTFs0.5小時(shí),分為Lat-FA組、Lat-FA+SP600125組、Lat-FA+SB203580組和La

6、t-FA+UO126組ELISA,共四組。Lat-FA處理細(xì)胞24小時(shí)后ELISA測得CTGF分泌量分別為:108.710±3.654ng/L,75.199±3.040ng/L,84.507±4.239ng/L,99.091±6.359ng/L;使用不同MAPK信號(hào)通路特異性阻斷劑的三組與Lat-FA組相比,均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　結(jié)論:Lat-FA對HTFs具有一定的促增殖作用,且該作用可能與時(shí)間和濃度存在一定相