牛乳鐵蛋白抗菌肽抗人肺癌細(xì)胞增殖及其作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：探索牛乳鐵蛋白抗菌肽(LfcinB)抗人肺癌細(xì)胞功能及其作用機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細(xì)胞株,實(shí)驗(yàn)分為:陰性對(duì)照組、LfcinB處理組和陽(yáng)性對(duì)照組。采用MTT法檢測(cè)牛乳鐵蛋白抗菌肽對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞增殖的影響,流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期和凋亡率。RT-PCR法檢測(cè)Bax、Bcl-2、Caspase-3mRNA水平的表達(dá)量;Westernblot方法檢測(cè)Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表達(dá)量。

2、　　結(jié)果：1、與陰性對(duì)照組相比,不同濃度的LfcinB作用48h后均對(duì)肺癌A549細(xì)胞增殖有抑制作用,其中以10-2g/L濃度的乳鐵蛋白抗菌肽的抑制率最高。2、與陰性對(duì)照組相比,不同濃度的LfcinB作用于肺癌A549細(xì)胞24、48和72h后,G0/G1期細(xì)胞略有減少,S期細(xì)胞逐漸增多,G2/M期細(xì)胞略有減少,且在72h結(jié)果最為顯著(P<0.01)。LfcinB在10-6～10-2mg/ml濃度范圍內(nèi)作用48、72h均可誘導(dǎo)肺癌A549

3、細(xì)胞凋亡,隨著藥物濃度增高,誘導(dǎo)凋亡作用加重,有明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。3、RT-PCR和Westernblot結(jié)果表明:與陰性對(duì)照組相比,Bax的表達(dá)隨著LfcinB濃度升高而升高;Bcl-2的表達(dá)隨著LfcinB濃度升高而降低;Caspase-3的表達(dá)隨著LfcinB濃度升高而升高。
　　結(jié)論：LfcinB能顯著抑制人肺腺癌A549細(xì)胞增殖,使細(xì)胞阻滯于S期,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。LfcinB通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞中Bax的表達(dá)及抑制Bcl-2的