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文檔簡介
1、目的:建立SD幼鼠卵白蛋白(Ovalbumin,OVA)食物過敏(Food Allergy,F(xiàn)A)模型,研究孟魯司特(Montelukast,MK)對FA幼鼠腸道炎癥的抑制作用以及血OVA-IgE含量變化,探討MK拮抗FA腸道炎癥的可能機(jī)制。
方法:32只3周齡雌性SD幼鼠,隨機(jī)分為四組,每組各8只,分別為對照組(Non-Model Non-Intervene,M0I0組)、對照干預(yù)組(Non-Model Intervene,
2、M0I1組)、模型組(Model Non-Intervene,M1I0組)、模型干預(yù)組(Model Intervene,M1I1組)。M1I0組和M1I1組幼鼠以O(shè)VA為過敏原,AL(OH)3為佐劑,通過腹腔注射致敏聯(lián)合灌胃激發(fā)建立模型,即在第0天給予每只幼鼠腹腔注射低劑量OVA和AL(OH)3混懸液共0.2ml(含卵白蛋白40μg,AL(OH)31mg),在第2、4、7、9、11天腹腔注射低劑量OVA40μg(0.2 mg/mlOVA
3、溶液0.2ml);在第20、24、28、30天給予高劑量OVA30mg(15mg/mlOVA溶液2.0ml)灌胃激發(fā);M0I0組和 M0I1組同期分別給予同等量的生理鹽水腹腔注射和灌胃。在第20開始至第30天,M0I1組和M1I1組每天予10mg/kg.d MK灌胃給藥一次, M0I0組和M1I0組同期予同等容量的生理鹽水灌胃。觀察大鼠一般情況(體重、腹瀉、活動(dòng)度),采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清OVA-IgE含量,用蘇木精-伊紅
4、(HE)染色法觀察腸黏膜病理改變及嗜酸性粒細(xì)胞(Eosinophils,EOS)密度,采用甲苯胺藍(lán)染色觀察肥大細(xì)胞(Mast Cell,MC)密度以及脫顆粒情況。采用SPSS19.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,α=0.05為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)
結(jié)果:M1I0組幼鼠激發(fā)后出現(xiàn)輕度豎毛,毛發(fā)失去光澤,活動(dòng)減少或俯臥不動(dòng),大便為成形稀便;M1I1組干預(yù)后豎毛減少,活動(dòng)度增加,大便較 M1I0組明顯成形;M0I0組、M0I1組激發(fā)前后一般情況無明
5、顯變化。四組幼鼠在第0天(D0)、第7天(D7)、第14天(D14)、第21天(D21)、第28天(D28)、第30天(D30)同期體重相比,差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。M1I0組幼鼠空腸黏膜炎癥損傷明顯;與 M1I0組相比,M1I1組幼鼠空腸黏膜炎癥損作減輕;M0I0組和M0 I1組幼鼠腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)正常。M0I0、M0I1、M1I0及M1I1組幼鼠致敏前血清OVA-IgE含量(μg/ml)分別為6.28±0.61、6.32
6、±0.59、6.16±0.71和6.51±0.64,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05);激發(fā)前四組幼鼠血清OVA-IgE含量(μg/ml)分別為6.80±0.69、6.56±0.63、9.75±0.65和9.75±0.62,M1I0和M1I1組血清OVA-IgE明顯高于 M0I0和M0I1組(P均<0.05);激發(fā)后各組幼鼠血清OVA-IgE含量(μg/ml)分別為7.01±0.61、6.66±0.61、13.12±0.70和10.19
7、±0.70,M1I0組血清OVA-IgE明顯高于M0I0、M0I1組和M1I1組(P均<0.05);M0I0、M0I1、M1I0及 M1I1組幼鼠空腸黏膜中 EOS密度(/HPF)分別為8.6±2.2、8.4±1.9、26.4±1.8和16.4±2.2;各組幼鼠空腸黏膜中MC密度(/HPF)分別為2.3±0.4、2.3±0.4、13.5±0.7及4.3±0.6;各組幼鼠空腸黏膜中MC脫顆粒率(%)分別為18.3(16.7,23.3),1
8、9.1(17.0,22.9),76.8(76.0,76.8),45.1(43.0,48.6)。M1I0組EOS密度、MC密度、MC脫顆粒率均高于M0I0、M0I1組和M1I1組(P均<0.05);析因方差分析顯示:激發(fā)后外周血清OVA-IgE水平、空腸黏膜EOS密度、MC密度及MC脫顆粒率均受造模和使用MK干預(yù)兩因素影響,造模與使用MK干預(yù)之間存在交互作用。
結(jié)論:MK可以減輕OVA致敏激發(fā)所致的FA幼鼠腸道炎癥損傷,而降低外
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