康萊特對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2體外增殖的抑制作用及機(jī)制.pdf

1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文康萊特對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2體外增殖的抑制作用及機(jī)制姓名：李昌生申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：肝膽外科指導(dǎo)教師：盧云20080515T H E I N H I B I T o R Y E F F E C T O F K I J o N T H E G R O W T H o FH E P A T O C E L L U L A R C A R C I N O M A C E L L L I N E H e p G 2A b

2、s t r a c tO b j e c t i v e T o s t u d y t h e p r o l i f e r a t i o n o f i n h i b i t i o n b y K a n g l a i t e i n t h eh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a c e l ll i n eH e p G 2 i nv i t r oa n df i

3、n di t sm e c h a n i s m ．T o p r o v i d e t h et h e o r y f o u n d a t i o n t h a t i f i t c a nb e u s e d f o r t h e c h e m o t h e r a p y o f h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a ．‘M e t h o d s T h

4、e H e p G 2 c e l l sw e r ec u l t u r e di nv i t r oa n d t r e a t e dw i t h K L T a td i f f e r e n td o s e s ( 5 l a 1 ／m l ，10 l a 1 ／m l ，15 l a 1 ／m l ，2 0l a l ／m 1 ) ．M T Tw a s u s e dt o o b s e r v e t h

5、 ei n h i b i t i o ne f f e c to f K L T ‘o nc e l l sg r o w t h ．F l o wc y t o m e t r y ( F C M ) w a s u s e dt o d e t e c ta p o p t o s i sa n dt h ea p o p t o s i sr e l a t e dc h a n g eo f p r o t e i nF a

6、sa n d F a s - L ．R e a l - t i m ef l u o r e s c e n tq u a n t i t a t i v eR T - P C R m e t h o dw a s a p p l i e d t oi n v e s t i g a t et h eq u a n t i t a t i v ee x p r e s s i o no f F a sa n d F a s ．Lm R

7、N A ．R e s u l t s ( 1 ) K L T p r o d u c e da n o b v i o u s t i m e - a n d —d o s e —d e p e n d e n t i n h i b i t i o ne f f e c to nt h e H e p G 2c e l l s ．T h e l i v e c e l l s d e c r e a s e dg r a d u a

8、l l yw i t h t h e i n c r e a s i n g o fd r u gc o n c e n t r a t i o na n d d i s p o s a lt i m e ．( 2 ) M a r k e d l y a p o p t o s i s w a s d e t e c t e db yF C M i nH e p G 2c e l l s a f t e rt r e a t m e n

9、 tb yK L T ；c o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u p ，t h ea p o p t o s i s r a t e o fe x p e r i m e n t a l g r o u ph a d ag r e a ti n c r e a s e ．( 3 ) T h e p r o t e i no f F a s i n c r e a s e d 1 1

10、．0 1 ％，1 8 ．7 1 ％，2 8 ．7 1 ％，3 7 ．1 5 ％，a n dt h ep r o t e i no f F a s —Li n c r e a s e d1 ．4 9 ％，1 ．9 1 ％，3 ．2 7 ％，3 ．3 8 ％i n c o m p a r i s o nw i t ht h ec o n t r o l ( P < 0 ．0 5 ) ．( 4 ) R e a l - t i m ef

11、l u o r e s c e n tq u a n t i t a t i v eR T —P C Rs h o w e d t h a tt h ee x p r e s s i o no f F a s m R N A a n dF a s - L m R N Aw a s a p p a r e n t l yi n c r e a s e d o nt h et r e a t i n gc e l l s w i t h K

12、 L T ．C o n c l u s i o n ( 1 ) K L Tp r o d u c e d a n o b v i o u s i n h i b i t i o ne f f e c t o nH e p G 2c e l l s a n di n d u c e dH e p G 2 a p o p t o s i s ；( 2 ) K L T c a n i n c r e a s et h ee x p r e s

13、 s i o n o f F a s a n d F a s - L p r o t e i na n d t h ee x p r e s s i o no f F a sm R N A a n d F a s - L m R N A ．T h i sm a y p r o b a b l yp l a y a ni m p o r t a n tf u n c t i o n i nt h e i n h i b i t i o n

14、a n d a p o p t o s i s o f H e p G 2 i n d u c e d b yK L T ．P o s t g r a d u a t e s t u d e n t ：L iC h a n g s h e n g ( H e p a t o b i l i a r y S u r g e r y )D i r e c t e db yP r o f i L u Y u nK e y w o r d s