淫羊藿素抑制肝癌HepG2細(xì)胞增殖機(jī)制初步研究.pdf

1、肝癌是全世界最常見(jiàn)癌癥之一,中國(guó)是肝癌的重災(zāi)區(qū),中國(guó)肝癌人數(shù)及死亡率均居世界之首,研究肝癌治療手段和藥物對(duì)于中國(guó)來(lái)說(shuō)意義重大。淫羊藿歷來(lái)就是傳統(tǒng)中藥中的一味補(bǔ)益藥材,歷代本草中皆有記載,主要有堅(jiān)筋骨、補(bǔ)腎陽(yáng)、強(qiáng)心力等藥用價(jià)值。淫羊藿素是淫羊藿中的一種活性成分。淫羊藿素具有心血管保護(hù)、促進(jìn)骨質(zhì)形成、調(diào)節(jié)人體免疫力等功能外,還具有抑癌作用,但是對(duì)于淫羊藿素抑癌的機(jī)理研究卻非常少,其抗癌作用機(jī)制尚未完全揭示。本文以人肝癌HepG2細(xì)胞為研究材

2、料,應(yīng)用流式細(xì)胞檢測(cè)、RT-PCR、Western blot等方法研究淫羊藿素對(duì)HepG2細(xì)胞的增殖影響,主要研究結(jié)果包括以下幾個(gè)方面:
　　(1)淫羊藿素有效抑制肝癌HepG2細(xì)胞增殖,并且抑制能力呈現(xiàn)劑量和時(shí)間依賴性。通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)表明,淫羊藿素能夠顯著抑制HepG2細(xì)胞的增殖,且藥物濃度越高、作用時(shí)間越長(zhǎng),其抑制作用越強(qiáng)。
　　(2)淫羊藿素對(duì)HepG2細(xì)胞S期進(jìn)行阻滯。通過(guò)不同濃度梯度的淫羊藿素處理肝癌HepG2細(xì)胞

3、24 h后,運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期情況,隨著藥物濃度的增加表現(xiàn)出明顯的S期阻滯。RT-PCR結(jié)果表明S期關(guān)鍵基因cyclin A和CDK2在轉(zhuǎn)錄水平上的表達(dá)明顯減弱,并表現(xiàn)出明顯的藥物劑量依賴性,與流式檢測(cè)周期結(jié)果相吻合,證明淫羊藿素能夠?qū)⒓?xì)胞周期阻滯在S期。Western blot檢測(cè)p53和p21的表達(dá),表明淫羊藿素有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的效果。
　　(3)淫羊藿素抑制HepG2細(xì)胞增殖的途徑為抑制JAK2/STAT3信號(hào)通路

4、的過(guò)度活化。采用RT-PCR和Western blot檢測(cè)不同濃度淫羊藿素處理24 h后的HepG2細(xì)胞中JAK2和STAT3的mRNA水平及p-JAK2和p-STAT3的表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)表明處理后的腫瘤細(xì)胞中JAK2和STAT3的mRNA水平明顯下降,p-JAK2和p-STAT3的表達(dá)明顯降低,說(shuō)明淫羊藿素能有效降低腫瘤細(xì)胞中JAK2/STAT3信號(hào)通路的過(guò)度活化。
　　從上述結(jié)果表明,淫羊藿素有著顯著的抗癌效果,為抗肝癌藥物的研