中藥成分對(duì)延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞活力和氧化修復(fù)能力的影響.pdf

1、【目的】
　　本試驗(yàn)通過(guò)在延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)液中分別添加中藥成分淫羊藿苷、小檗堿和川芎嗪來(lái)驗(yàn)證其對(duì)延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞活力和氧化修復(fù)的影響，確定中藥成分提高延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞活力的最佳濃度及評(píng)估其對(duì)氧化損傷細(xì)胞修復(fù)能力。為改進(jìn)延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞在延邊黃牛體細(xì)胞克隆中的應(yīng)用和日后延邊黃牛的保種工作提供技術(shù)支持。
　　【方法】
　　1.體外培養(yǎng)延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞至第四代后，在DMEM培養(yǎng)液中分別添加不同濃度

2、的淫羊藿苷、小檗堿和川芎嗪，培養(yǎng)24、48、72、96小時(shí)后，用MTT法測(cè)出細(xì)胞活力并對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，篩選出最佳濃度。
　　2.在DMEM培養(yǎng)液中同時(shí)添加兩種最佳濃度中藥成分，培養(yǎng)96h后，用MTT法測(cè)出細(xì)胞活力并對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　3.氧化損傷的延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞中分別添加最佳濃度的淫羊藿苷、小檗堿和川芎嗪，培養(yǎng)96h后，用 MTT法測(cè)出細(xì)胞活力，對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后與細(xì)胞的對(duì)照組和自我修復(fù)組作比較

3、，評(píng)估它們的氧化修復(fù)能力。
　　【結(jié)果】
　　1.在淫羊藿苷對(duì)牛耳成纖維細(xì)胞的影響試驗(yàn)中，淫羊藿苷試驗(yàn)組均能提高延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞的活力。淫羊藿苷濃度范圍在0.001μg/ml~0.1μg/ml的細(xì)胞培養(yǎng)到72h后，細(xì)胞活力均顯著高于對(duì)照組。其中，濃度為0.001μg/ml提高細(xì)胞活力效果最好。
　　2.在小檗堿對(duì)牛耳成纖維細(xì)胞的影響試驗(yàn)中，小檗堿濃度范圍在0.01μmol/L~1μmol/L均能提高延邊黃牛耳成纖維

4、細(xì)胞活力，而且培養(yǎng)到72h后細(xì)胞活力均顯著高于對(duì)照組。其中，濃度為1μmol/L提高細(xì)胞活力效果最好。
　　3.在川芎嗪對(duì)牛耳成纖維細(xì)胞的影響試驗(yàn)中，川芎嗪濃度范圍在25μg/ml~50μg/ml均能夠提高延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞活力。其中，濃度為50μg/ml提高細(xì)胞活力效果最好，細(xì)胞培養(yǎng)到72h后細(xì)胞活力顯著高于對(duì)照組。
　　4.在中藥成分聯(lián)合作用對(duì)延邊黃牛耳成纖維的影響試驗(yàn)中，川芎嗪和小檗堿試驗(yàn)組、小檗堿和淫羊藿苷試驗(yàn)組抑

5、制了延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞的活力，而川芎嗪和淫羊藿苷試驗(yàn)組能提高延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞的活力，但與對(duì)照組不存在顯著差異。
　　5.在淫羊藿苷對(duì)延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞氧化損傷的修復(fù)試驗(yàn)中，淫羊藿苷修復(fù)組的細(xì)胞活力與自我修復(fù)組相比差異性顯著，而對(duì)照組的細(xì)胞活力比淫羊藿苷修復(fù)組高，但差異性不顯著。結(jié)果表明：淫羊藿苷具有氧化修復(fù)能力。
　　6.在小檗堿對(duì)延邊黃牛耳成纖維細(xì)胞氧化損傷的修復(fù)試驗(yàn)中，小檗堿修復(fù)組的細(xì)胞活力與自我修復(fù)組相比差異性