常見海洋污染物對(duì)褐菖鲉肝HSP60和HSP70蛋白含量的影響.pdf

1、熱應(yīng)激蛋白(Heat Shock Proteins，HSPs)是一種生物體內(nèi)普遍適用并高度存在的應(yīng)激蛋白，在外界污染影響下，HSPs的表達(dá)量發(fā)生變化，能快速保護(hù)細(xì)胞對(duì)抗外源性或內(nèi)源性應(yīng)激的攻擊，提高細(xì)胞的修復(fù)能力并增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)付應(yīng)激的耐受程度。HSPs的誘導(dǎo)被認(rèn)為是反映環(huán)境污染狀況最靈敏的生物學(xué)反應(yīng)之一，本文著重研究海洋魚類HSP60和HSP70蛋白對(duì)常見海洋污染物的響應(yīng)規(guī)律，探討作為生物標(biāo)志物的可行性。
　　本研究利用蛋白印跡法測(cè)

2、定不同濃度石油水溶性成分(water soluble fraction，WSF)(20μg·L-1、40μg·L-1、80μg·L-1、160μg·L-1、320μg·L-1)、Cd和Pb(0.8μg·L-1、4.0μg·L-1、8.0μg·L-1、40μg·L-1、80μg·L-1)單獨(dú)污染后，以及WSF和重金屬復(fù)合污染后褐菖鲉肝HSP60和HSP70的表達(dá)量，分析不同類型污染后HSP60和HSP70蛋白含量之間的濃度-效應(yīng)和時(shí)間-效

3、應(yīng)規(guī)律。主要研究結(jié)果如下:
　　(1) WSF單獨(dú)污染的劑量-效應(yīng)實(shí)驗(yàn)表明，不同濃度WSF單獨(dú)污染5d后對(duì)HSP60和70蛋白含量都沒有顯著影響，但延長暴露時(shí)間可顯著誘導(dǎo)HSP70的表達(dá)，抑制HSP60的表達(dá)。
　　(2)重金屬單獨(dú)污染的劑量-效應(yīng)實(shí)驗(yàn)表明，0.8μg·L-1的Cd顯著抑制HSP60蛋白的表達(dá)，但是4.0μg·L-1和更高劑量的Cd顯著誘導(dǎo)HSP60的表達(dá)。Pb整體而言顯著抑制HSP60蛋白的表達(dá)。Cd和Pb

4、對(duì)HSP70的劑量-效應(yīng)影響規(guī)律非常相似:在0.8μg·L-1時(shí)即出現(xiàn)顯著抑制，在4.0μg·L-1恢復(fù)至對(duì)照組水平，隨濃度增大，HSP70蛋白含量又出現(xiàn)顯著下降，整體表現(xiàn)為抑制效應(yīng)。
　　(3)重金屬單獨(dú)污染的時(shí)間-效應(yīng)實(shí)驗(yàn)則顯示Cd和Pb對(duì)HSP蛋白含量的影響規(guī)律非常不同。Cd在暴露的第6d才開始顯著誘導(dǎo)HSP60蛋白含量，且隨時(shí)間延長蛋白含量保持穩(wěn)定;而HSP70蛋白在第2d即被顯著誘導(dǎo)并達(dá)到最大值，為對(duì)照的4.18倍，隨后

5、緩慢下降至對(duì)照水平。Pb僅在第10d顯著誘導(dǎo)HSP60和HSP70蛋白的表達(dá)，分別是對(duì)照的3.0倍和7.5倍。
　　(4)復(fù)合污染的劑量-效應(yīng)實(shí)驗(yàn)表明，隨著WSF+Pb濃度的增大，HSP60和HSP70蛋白表達(dá)量增加，且HSP60被顯著誘導(dǎo)。但當(dāng)WSF濃度超過80μg·L-1之后，HSP60蛋白表達(dá)被顯著抑制。HSP70在80μg·L-1WSF+8μg·L-1Pb時(shí)被顯著誘導(dǎo)，其他濃度時(shí)HSP70蛋白表達(dá)則沒有顯著變化。WSF+C

6、d復(fù)合污染對(duì)HSP70的影響不顯著。并且只有40μg·L-1WSF及80μg·L-1WSF和40μg·L-1Cd復(fù)合污染時(shí)才會(huì)顯著誘導(dǎo)HSP60表達(dá)，其他濃度對(duì)HSP60的影響也不顯著。
　　(5)復(fù)合污染的時(shí)間-效應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，WSF+Pb復(fù)合污染顯著抑制HSP70蛋白的表達(dá);在污染的第2d誘導(dǎo)HSP60的表達(dá)，但在第8d卻又抑制HSP60的表達(dá)。HSP60、HSP70蛋白含量隨WSF+Cd復(fù)合污染時(shí)間延長有所波動(dòng)，但都沒有達(dá)