玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)交配型的分子檢測.pdf

1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文玉米大斑病菌（Setosphaeria turcica）交配型的分子檢測姓名：王媛媛申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物檢疫與農(nóng)業(yè)生態(tài)健康指導(dǎo)教師：張國珍20070601A b s t r a c tN o r t h e m c o r nl e a f b l i g h tw h i c h c a u s e db yS e t o s p h a e r i a t u r c i c ai sa ni m p

2、 o r t a n t f u n g a ld i s e a s ea n ds e v e r e l y d a m a g e d t o c o r np r o d u c t i o n ．Am o l e c u l a rm e t h o df o rd e t e c t i n g m a t i n gt y p eo ft h ep a t h o g e nw a s d e v e l o p e d

3、 ．T h em a i n r e s u l t s a r c a sf o l l o w ：1 ．A c c o r d i n gt ot h es e q u e n c eo f H M G ( h i g h m o b i l i t yg r o u p ) b o x , t h ec o n s e r v e dr e g i o no f M A T l - 2g e n e ，ap a i ro fp r

4、 i m e r s ，H M G - U ／H M G —L ' W a s d e s i g n e da n du s e d t od e t e c tt h e ^ 糾刀．2 ．AD N A b a n da b o u t 2 5 0 b p w a s a m p l i f i e d o n l yf r o m s t r a i n $ w h i c h m a t i n g t y p eW a

5、s M A T 刀- 2 ；C o m p a r i n g t h es e q u e n c e so fA l p h a b o x , t h e c o n s e r v e dr e g i o no f M A T l —1g e n e ，f r o m 16f u n g a ls p e c i e sb e l o n g t oP l e o s p o r a l e s ，ap a i ro fd e

6、 g e n e r a t ep r i m e sW a s d e s i g n e df o r d e t e c t i n g t h eM A T ／一J ．Ab a n d o f3 4 5 b p W a s a m p l i f i e d f r o mM A T ／- Js t r a i n s w i t ht h ep r i m e r s ．A c c o r d i n gt ot h es e

7、 q u e n c eo ft h eP C Rp r o d u c t , ap a i r o f s p e c i f i cp r i m e r s ，A l p h a - U ／A l p h a - L ，W a sa l s o d e s i g n e da n dc o u l da m p l i f yaD N A b a n da b o u t 2 0 0 b pf r o mM A T ／．1s

8、t r a i n s ．2 ．T h e s t r a i n sw h i c h d e t e c t e db yP C R w e r ee x a m i n e d i np a i r i n gc u l t u r e ．T h e r e s u l t sm a t c h e d w i t hP C R v e r yw e l l ．T h e r ew e r es e v e r a ls t r

9、a i n sw h i c hr e s u l t so f p a i r i n gc u l t u r ew e r ed i f f e r e n tf r o mP C Rr e s u l t s ．T h eP C Rp r o d u c t so fc o n s e r v e dr e g i o n s o f m a t i n g - t y p eg e n e s o f f o u rs t r

10、 a i n sw e r es e q u e n c e d ．T h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h es e q u e n c e sw e r ei d e n t i c a lw i t ht h e o b j e c tr e g i o n s ．T h r o u g hv a l i d a t i o no fm a t i n g - t y p e sb y b i

11、 o l o g i c a la n d m o l e c u l a r m e t h o d s ，t h eP C R m e t h o d f o rd e t e c t i n g t h em a t i n g t y p eo f t h ep a t h o g e n W a s r a p i da n d e x a c t ．I t t o o ks h o r t e rt i m ea n d W

12、 a s m o r e r e l i a b l et h a nt r a d i t i o n a lm e t h o d ．3 ．T h ef l a n k i n g s e q u e n c e so fm a t i n gt y p eg e n e sw e r ea i m e dt oa m p l i f y ．As e q u e n c eo f 3 5 0 b p ，w h i c hW a sa

13、 t t h e l e f t f l a n k i n g o fA l p h ab o x , W a so b t a i n e db yT A I L —P C Rf r o mM A T ／- 1 s t r a i n ．I tp r o v i d e dt h ef o u n d a t i o n f o rc l o n i n g t h em a t i n g - t y p e g e n e o